7第十三章蛋白质的生物合成.pptVIP

5．多聚核糖体（polyribosome, or polysome） 五 真核生物与原核生物蛋白质合成的差异 真核细胞蛋白质的生物合成与原核细胞相似，但过程更复杂，参加的因子更多。 * * 第十三章 蛋白质的生物合成 一 遗传密码 遗传密码实际上是指mRNA中的核苷酸排列序列与蛋白质中的氨基酸排列序列的关系。 一个三联体密码（密码子）决定着一个氨基酸。mRNA中共有64种密码子，AUG既是Met的密码，也是“起始”密码。UAA、UAG、UGA是终止密码。 生物的遗传密码是通用的。 在起始密码上游约10个核苷酸处，通常有一段富含嘌呤的序列，称为SD序列。SD序列使mRNA与小亚基结合。 二 核糖体 （一）核糖体是蛋白质合成的部位 （二）核糖体的组成和结构 原核细胞的核糖体 真核细胞的核糖体 （三）核糖体的功能 核糖体上有两个tRNA结合位点：肽链结合 位（P位）和氨酰接受位（A位）。 原核生物核糖体 70S 50S 30S 5S rRNA， 23S rRNA 34种蛋白质 16S rRNA 21种蛋白质 真核生物核糖体 80S 60S 40S 5SrRNA，5.8SrRNA，28SrRNA 49种蛋白质 18SrRNA 33种蛋白质 三 tRNA的功能 tRNA分子上与蛋白质合成有关的位点： 1. 3′端-CCA上的氨基酸接受位点。 2. 识别氨酰-tRNA合成酶的位点。 3. 核糖体识别位点，使延长中的肽链附着于核糖体上。 4. 反密码子位点。 第一套密码系统、第二套密码系统 蛋白质生物合成的分子机制 蛋白质合成的一般特征： 蛋白质生物合成的方向：N端→C端 mRNA的翻译方向：5ˊ→3ˊ 蛋白质合成除需要aa外，还需要ATP、GTP，一系列酶 和许多辅助因子。 （一）氨基酸的激活 ATP + HOOCCH(NH2)R → A—P—OCCH(NH2)R + PPi P A—P—OCCH(NH2)R + tRNA →RCH(NH2)CO-tRNA + AMP P （三）肽链合成后的“加工处理” （四）蛋白质合成所需的能量 （五）活性肽合成的特征 3. 肽链合成的终止和释放 2. 肽链的延长 1. 肽链合成的起始 （二）在核糖体上合成多肽 E.Coli蛋白质的生物合成 : 1.氨基酸的活化： 由高度特异的氨酰-tRNA合成酶 (aminoacyl-tRNA synthetase)催化，反应分两步 总反应式 2．肽链的起始： mRNA中的起始密码是AUG，少数是GUG。 起始密码子的上游约10个核苷酸的地方往往有一段富含嘌呤的序列称SD序列（Shine-Dalgarno序列），一般为3～10个核苷酸，它与核糖体16srRNA 3ˊ端的核苷酸序列互补，可促使核糖体与mRNA的结合。 在E.Coli和其它原核生物中与这起始密码（AUG）相对应的tRNA是甲酰甲硫氨酰—tRNA（fMet-tRNAf Met），这是起始tRNA。 起始tRNA怎样形成？由甲硫氨酰-tRNA甲酰化 tRNA Met Met-tRNA 甲酰基转移酶 N10－甲酰FH4 FH4 （fMet－tRNAf） 甲酰基 Structure of N-formyl-methionyl-tRNA[Met] Differences with other tRNAs 细胞内有2种可携带Met的tRNA，它们都识别同样的AUG密码子，但它们的一级结构和功能不同。 （2）tRNAmMet带上Met后不能甲酰化，用于肽链的内部，在肽 链延伸中起作用。 （1）tRNAf Met 带上Met后能甲酰化，是起始tRNA，用于肽链 合成的起始。 所以AUG和GUG是兼职密码子，它们既可以作为起始密码子，作为肽链合成的起始信号，这时与之对应的氨基酸是甲酰Met。另外也可作肽链内部相应aa的密码，这时AUG编码Met,GUG编码val。 Met ATP/ Mg 2+ + tRNAm Met tRNAf Met Met-tRNAmMet Met-tRNAfMet fMet-tRNAfMet N10-Formyltetrahydrofolate Transformylase AMP/Mg2+ PPi The same aaRS AMP/Mg2+PPi 肽链合成的起始除了需要起始密码、SD序列、起始tRNA外还要三种起始因子（initiation factor），即IF-1， IF-2 和IF-3，还要消耗GTP，还需核糖体大小亚基参与，形成一个70S的真正起始复合物。 inactive 70S ribosome SD se