第3节基因工程与转基因生物.pptVIP

一、基因工程 1、切割DNA的工具——限制性核酸内切酶 2、DNA连接酶 二、基因工程的基本过程 ◆获取目的基因 ◆目的基因与运载体重组 三、转基因技术的应用 ◆植物基因工程 ◆动物基因工程 * 第3节 基因工程与转基因生物 转基因食品 转基因食品 河南省新乡县转基因抗虫棉实验田 我国具有自主知识产权的抗虫棉的培育程序： 将重组DNA导入选育棉花细胞内 使抗虫基因在该棉花细胞中表达 从具有抗虫性状的细菌 DNA分子中获取抗虫基因 将抗虫基因与运载体 拼接成为重组DNA 需要三种工具： ◆切割DNA ◆连接DNA和运载体 ◆运载体 就是当异源DNA分子渗入细胞后，要遭到它的切割破坏 ◆专一性——能识别双链DNA 分子的某些特定脱氧核苷酸序列，并且切断其中特定部位 的两个脱氧核苷酸之间的键。如： 特点： 限制酶EcoRⅠ识别的碱基序列 G A A T T C C T T A A G 限制酶HindⅢ识别的碱基序列 A A G C T T T T C G A A ◆限制异原DNA的入侵并使之失去活力，对自身的DNA无损害作用。 ◆限制酶可以产生黏性末端——即在切割时，DNA双链不在同一处断开，因而产生的片段都带有数个碱基的尾巴。如： G A A T T C G A A T T C C T T A A G C T T A A G A A T T C G G C T T A A 黏性末端 黏性末端 切下的DNA片段 广泛存在于：细菌、噬菌体、酵母菌、植物和动物细胞内。 作用：将断裂的DNA黏性末端连接起来 ——DNA连接酶 2、化学浆糊 运载体 3、分子运输车 （2）条件 能在宿主细胞内自我复制并稳定地保存 （1）作用 在宿主细胞大量复制目的基因 将目的基因运送到宿主细胞中 具有多个限制酶切点 具有标记基因 双链闭环DNA分子 能自我复制 带抗性基因 质粒 （3）最常用 导入的生物细胞，即能接纳重组DNA的活细胞 。 人们为了得到其表达产物而把它转入到新的生物体中去的基因。 目的基因 受体细胞 四个步骤： ◆获取目的基因 ◆目的基因与运载体重组 ◆重组DNA分子导入受体细胞 ◆筛选含目的基因的受体细胞 目的基因——是人们为了得到其表达产物而把它转入到 新的生物体中去的基因 从生物体 细胞中分离 通过化学方 法人工合成 获得目的 基因的方法 步骤 基因定位（确定目的基因在DNA上的位子） 用限制酶从 DNA分子中切取 mRNA DNA 方法 逆转录酶 ◆筛选含目的基因的受体细胞 用与切取目的基因相同的限制酶将质粒切开，然后在DNA连接酶的作用下，使目的基因与质粒组合，形成重组质粒。（重组DNA） ◆重组DNA分子导入受体细胞 ●质粒DNA分子上通常有特殊的遗传标记基因，所以重组质粒也具有遗传标记基因（如抗生素抗性基因，也可以在质粒上人工重组抗性基因）。 ●受体细胞获得重组质粒的同时也获得了抗性基因，所以受体细胞能在含有抗生素的培养基中生长，未成功导入重组质粒的受体细胞无法在含有抗生素的培养基中生长而死亡。 ◆微生物基因工程 特点：操作较为容易，研制周期比较短，通过发 酵大量生产。 成果：药用蛋白质的规模化生产。如： 结构简单 繁殖迅速 治疗：胰岛素依赖性糖尿病——人胰岛素 急性胰腺炎、糖尿病和肢端肥大症——人脑激素 （人生长激素释放抑制因子） 肺气肿——αⅠ抗胰蛋白酶 不排卵症——绒毛膜促性腺素 恶性肿瘤——白细胞介素 溶血栓——组织型纤溶酶原吉活剂 抗肿瘤——肿瘤坏死因子 助产——松弛素 成果：培育出抗性植物，如；我国的转基因抗虫棉。 全世界有近200种转基因植物，我国有抗病毒烟草、 耐储存转基因番茄 正在研究将预防乙型肝炎、龋齿等疾病的疫苗基因 转入植物，来培育植物疫苗，以期通过食物获得