伪狂犬病病毒上海株gE和g.PDFVIP

维普资讯 第 17卷 2期 中 国 病 毒 学 17(2)：149—152 2002年 5月 VIR(】I』)GICA SINICA May 2002 伪狂犬病病毒上海株 gE和gI基因的克隆及缺失转移载体的构建 姜 焱 ，侯玉峰 ，陈德胜 ，陈溥言P (1南京农业大学动物医学院．江苏 南京 210095；2南束出^境检验检痤局．江苏 南京210001) Cloning，Construction ofgE GeneandgIGenePartialDeletion M utantofPseud0rabiesVirusSH Strain JIANG Yan ．HOU Yu—feng，CHEN De—sheng，CHEN Puyan “ (1．CollegeofVeterinaryMedicine，NanjingAgicultureUniversit~，Nanjing210095，China； 2NanjiN EHsrv—E武r lnspectio．Tfl，dQ¨rantingBeaury NaH}ing210001 China Abstract：AccordingtotheGenbankopensequence，twopairsofprimerweredesignedinordertoam— plifygEgeneandpartialgIgeneofpseudorabiesvirusShanghaistrain，respectively．Theg￡geneand partialgIgenewereobtainedbypo]ymerasechainreaction(PCR)，subsequentlyclonedintopGEM T vector．Then both ofthem wereinsertedintopUCI8 vector．Therecombinantplasmid pgEIdeleted partofgIgenewasconstructed． Keywords：Pseudorabiesvirus；glgene； gene 摘要：根据已发表的伪狂犬病病毒(P~udorabiesVirus．PRV)II~gt和gE基因序列．设计两对引物用PCR方法扩增 出PRV—SH 和gE基因，将其克隆^pUC18载体中．获得了缺失部分 基因的转移载体质粒，命名为pgEI 关键词 ：伪狂犬病病毒 ；gl基因；gE基 因 中图分类号：R3739 文章标识码 ：A 文章编号2002)020149—04 伪狂犬病病毒 (PseudorabiesVirus，PRV)可引 复合体 gt／gE，是影响 PRV生长的功能成分[”]。 起多种家畜和野生动物的伪狂犬病，尤其是猪 的伪 gE基 固是影响毒力的重要基 因之一，且决定毒力 狂犬病已成为危害当今养猪业最严重的传染病之 的部位在第 125位和第 126位的两个氨基酸，只要 -- [ 但各种灭活疫苗及弱毒疫苗对该病的防制 、 突变这两个氨基酸，其毒力就会大大 的降低 ¨。现 根除及对持续性感染的防制都是不成功的itIo随 已证 明， 也与毒力有关，且对诱导完全保护是必 着分子生物学的发展，对一些传染病病原的分子剖 须的(。 析，使致病基因和免疫保护性抗原基因的鉴定和分 本研究用 PCR的方法扩增 厂 f的部分基 因和 离得 以实现 。J‘。 自20世纪 70年代 以来．通过对 全基因，并克隆到 pUC18中，构建了 pgEI转移 PRV基因组的改造 已先后研制了多利 PRV基固歃