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专题81+基因工程（二） 高考频度：★★★☆☆ 难易程度：★★★☆☆ 1．基因工程的操作过程与应用 （1）基因工程的操作步骤 （2）基因工程的应用：培育转基因植物和转基因动物，生产基因工程药物，进行基因治疗。 （3）目的基因导入不同受体细胞的过程 生物种类 植物 动物 微生物 常用方法 农杆菌转化法 显微注射技术 感受态细胞法 受体细胞 体细胞或受精卵 受精卵 原核细胞 转化过程 将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞染色体的DNA上→表达 将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 （4）基因治疗与基因诊断的不同点 原理 操作过程 进展 基因治疗 基因表达 利用正常基因导入有基因缺陷的细胞中，以表达出正常性状来治疗(疾病) 临床实验 基因诊断 碱基互补配对 制作特定DNA探针与病人样品DNA混合，分析杂交带情况 临床应用 2．蛋白质工程 （1）流程图 写出流程图中字母代表的含义： A．转录，B．翻译，C．分子设计，D．多肽链，E．预期功能。 （2）结果：改造了现有蛋白质或制造出新的蛋白质。 （3）应用：主要集中应用于对现有蛋白质进行改造，改良生物性状。 考向一 目的基因的获取及基因表达载体的构建 1．如图表示用化学方法合成目的基因Ⅰ的过程。据图分析，下列叙述正确的是 A．过程①需要DNA连接酶 B．过程②需要限制性核酸内切酶 C．目的基因Ⅰ的碱基序列是已知的 D．若某质粒能与目的基因Ⅰ重组，则该质粒和目的基因Ⅰ的碱基序列相同 【参考答案】C 归纳整合几种目的基因获取方法的比较 归纳整合 几种目的基因获取方法的比较 方法 从基因文库中获取 人工合成 从基因组文 库中获取 从部分基因文库，如cDNA文库中获取 化学合成法 反转录法 过 程 2．下图是利用基因工程技术生产可食用疫苗的部分过程，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。下列有关说法中正确的是 A．图示过程是基因工程的核心步骤，所需的限制性核酸内切酶均来自原核生物 B．图示中构建基因表达载体时，需用到一种限制性核酸内切酶 C．一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核糖核苷酸序列 D．抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来 【答案】D 考向二 基因工程的操作及应用实例分析 3．下面图1为某植物育种流程，图2表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。下列相关叙述错误的是 A．图1子代Ⅰ与原种保持遗传稳定性，子代Ⅱ和子代Ⅲ选育原理相同 B．图1子代Ⅲ选育显性性状需自交多代，子代Ⅴ可能发生基因突变和染色体变异 C．图2中①过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与 D．图2中⑥可与多个核糖体结合，并可以同时翻译出多种蛋白质 【参考答案】D 图2中⑥可与多个核糖体结合，并可以同时翻译出多个同种蛋白质分子，D错误。 技法提炼1 技法提炼 1．基因表达载体中启动子、终止子的来源 （1）如果目的基因是从自然界中已有的物种中分离出来的，在构建基因表达载体时，不需要在质粒上目的基因的前后端接上特定的启动子、终止子，因为目的基因中已含有启动子、终止子。 （2）如果目的基因是通过人工方法合成的，或通过cDNA文库获得的，则目的基因是不含启动子和终止子的。若只将基因的编码序列导入受体生物中，目的基因没有启动子、终止子，是无法转录的，因此，在构建基因表达载体时，需要在与质粒结合之前，在目的基因的前后端接上特定的启动子、终止子。 2．基因工程中的几种检测方法 4．下图表示科学家培育耐寒生物的过程，请回答： （1）从cDNA文库中获取的目的基因_________(填“有”或“无”)启动子。实现①过程常用_________技术，该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成_________。 （2）②表示_________，其中标记基因的作用是__________________________。 （3）转基因技术是否成功，需要对受体细胞进行分子水平的检测，首先用DNA分子杂交技术检测受体细胞染色体的DNA上是否插入目的基因，这种方法需要遵循_________原则。 （4）若要培育抗冻能力强的转基因羊，可将鱼的抗冻蛋白基因导入羊的_________中，培育该转基因羊的最后一道“工序”是胚胎工程的_________技术。 【答案】（1）无 PCR 引物 （2）基因表达载体 鉴别受体细胞中是否含有目的基因 （3）碱基互补配对 （4）受精卵 胚胎移植 则受体细胞为受精卵，培育该转基因羊的最后一道“工序”是胚胎移植技术。 考向三 蛋