微生物第八章.pptVIP

第三节 基因突变与诱变育种 8.3.1 基因突变类型和遗传效应 染色体的畸变： DNA复制时出错，使子代DNA上大段碱基序列缺失、重复、倒位，通常导致细胞死亡； 染色体的突变： DNA复制时出错，使子代DNA上少数碱基序列出现缺失、添加、置换； 基因突变（gene mutation）：突变出现在基因序列内，影响了基因编码产物的功能，或者基因的表达特性，并产生遗传效应； 点突变：仅在一个碱基位点发生的基因突变，是常见的基因突变； 基因突变的类型 碱基数量的突变：分为缺失和添加，如果发生在编码序列中，称为移码突变； 非编码序列基因突变的遗传效应 基因的表达元件发生基因突变，可能优化表达元件，也可能损伤表达元件，而影响基因的表达水平； 基因的调控元件发生基因突变，一般破坏其固有的表达调控机制，例如：由诱导型表达变为组成型表达； 编码序列基因突变的遗传效应 同义突变：碱基置换不改变密码子的含义； 错义突变；碱基置换改变了密码子的含义； 无义突变：碱基置换产生终止密码子UAA、UAG或UGA，使转译在突变处终止； 移玛突变：碱基的缺失或添加，使改变，使突变点以后的密码子的阅读框完全错位； 但是缺失或添加三个碱基，或缺失和添加数相等，则不会发生移码突变，而可能发生错义突变； 8.2.2 基因的自发突变机制 自发突变：由DNA固有的物化特性决定，以及胞内环境因素影响，在DNA复制时，偶然引发的基因突变；一般发生频率极低，约在10-6～10-9 之间； 碱基互变：碱基在酮式/烯醇式，氨式/亚氨式等异构体之间相互转变的特性； 胞嘧啶的自然脱氨基作用，使胞嘧啶变为尿嘧啶； 环出效应： DNA复制时，模板链与子链之间出现相对滑动而成环，造成子链发生碱基缺失或添加； 碱基的异构体及配对方式 碱基通常以常态结构存在，但也有一定几率，以异构体形态存在； 碱基互变导致基因的自发突变 在DNA复制过程中，如果某个G以烯醇式异构体存在，则与T配对，在子链中形成G-T错配；在下一次复制时，在子链中出现由G-C到A-T基因突变； 环出效应引起的基因自发突变 DNA复制时，子链滑动出现环出，则子链发生碱基添加；如果母链滑动出现环出，则子链发生碱基缺失； 子链再次复制时，其子链发生突变； 8.3.3 基因的诱发突变机制 诱发突变：由外界的物理、化学或生物因素直接或间接作用于胞内DNA 分子，而导致的基因突变；一般发生频率显著高于自发突变； 诱变剂：能够直接或间接增加胞内DNA的不稳定性，提高DNA复制出错几率的物理、化学、生物因素； 化学诱变剂：碱基类似物、氧化剂、烷化剂、插入染料等； 物理诱变剂：紫外线和电离辐射； 生物诱变剂：温和性噬菌体、转座因子等； 碱基类似物及诱变机制 碱基类似物：组成DNA的四种正常嘌呤或嘧啶碱基的结构类似物；如：5-溴尿嘧啶、5-氟尿嘧啶、8-氮鸟嘌呤、6-巯基嘌呤、2-氨基嘌呤等； 碱基类似物的诱变机制： 在DNA复制时，碱基类可替代正常碱基掺入到新合成的子链中； 但碱基类似物更容易发生常态结构和异构体之间的互变，在DNA下次复制时，提高错配的几率； 5-溴尿嘧啶的异构体和配对方式 5-溴尿嘧啶是嘧啶碱基类似物，可代替嘧啶核苷酸参与DNA复制； 酮式5-溴尿嘧啶替代T与A配对（5-BU-A）； 稀醇式5-溴尿嘧啶则替代C与G配对（5-BUe-G）； 5-溴尿嘧啶的诱变机制 5-溴尿嘧啶比正常碱基更容易发生酮式到稀醇式的互变，在DNA复制时，更容易产生错配，提高T-A到C-G的突变几率； 亚硝基胍（NTG）的诱变机制 N-甲基-N`-硝基-N-亚硝基胍是超强的鸟嘌呤烷化剂，使鸟嘌呤甲基化为O6-甲基鸟嘌呤； 常用烷化剂-硫酸酯和磺酸烷酯 常用烷化剂-亚硝基化合物类 常用烷化剂-环氧类和乙烯亚胺类 常用烷化剂-其它类 重氮甲烷（diazomethane ） b-丙酸内酯（ b- ptopylactone） 芥子气（mustard gas） 氮芥（nitrogen mustard ） 插入染料及诱变机制 插入染料是一类具有扁平形状的有机分子，如：溴化乙锭（EB）、丫啶橙、丫啶黄、原黄素等； 插入染料能够插入到双螺旋DNA中间堆积的碱基之间，在复制时引起DNA滑动，造成碱基的缺失或添加突变； 紫外线的诱变机制 紫外线照射可使胞内DNA上相邻的两个嘧啶之间形成二聚体；当DNA复制时，影响其模板功能，导致碱基对置换，诱发基因突变； 电离辐射的诱变机制 电离辐射：带有较高能量的能引起物质电离的电磁波，如：c射线、a射线、b射线、g射线等； 在温和剂量下，受电离辐射的胞内DNA电离发生损伤，导致基因突变；或者使胞内其它物质电离产生强氧化物，再作用于DNA分子，诱发基因突变； 各种诱变剂与DNA发生作用的位点是高度随机的，由此产生的DNA突变也是随机分