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菜 单 隐 藏 2013 · 新课标高考总复习 · 配人教生物 山东金太阳书业有限公司 一、基因工程 1．限制性内切酶使双链DNA特定部位的磷酸二脂键断开，解旋酶使双链DNA的氢键断开。 2．DNA连接酶与DNA聚合酶都能催化形成磷酸二酯键，前者催化连接DNA片段，后者催化单个的脱氧核苷酸聚合形成DNA。RNA聚合酶催化单个的核糖核苷酸聚合，形成RNA。 3．基因组文库包含了某种生物全部基因，cDNA文库只包含某种生物的部分基因。 4．启动子位于基因的首端，它驱动基因转录出mRNA，起始密码子位于mRNA的首端，它驱动mRNA翻译成多肽链。 5．将目的基因导入植物细胞常用土壤农杆菌转化法，常导入植物体细胞，经组织培养后形成转基因植株；导入动物细胞常用显微注射法，常导入受精卵，经胚胎移植获得转基因动物；利用基因工程生产药物时，常将基因导入微生物，导入大肠杆菌常用Ca2＋处理成感受态细胞再进行转化。 6．检测是否导入目的基因及目的基因是否转录出mRNA常用DNA分子杂交法，检测目的基因是否表达出蛋白质常用分子杂交法，有时基因工程还需要进行个体生物学水平鉴定。 7．DNA复制用解旋酶打开氢键获得模板链，PCR利用高温使氢键断裂得到模板链。 8．基因工程通过转基因获得异种生物的蛋白质，蛋白质工程通过基因修饰或基因合成，对蛋白质进行改造或制造出自然界没有的蛋白质。 1．2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光。借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。 GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠，如图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程： 请根据上述材料回答下列问题： 请根据上述材料回答下列问题： (1)用于培育绿色荧光小鼠的基因表达载体的组成必须有启动子、________、________和________等。图中过程②常用的方法是________；过程③利用的生物技术是________；在进行过程④前，利用________可以获得数目更多且基因型相同的绿色荧光小鼠。 (2)GFP基因与目的基因一起构建到载体上不影响目的基因的表达，也不影响由目的基因控制合成的蛋白质的结构与功能，且对细胞无毒性，因此GFP基因可以作为基因表达载体上的________。 (3)目前科学家们通过________工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，该工程是直接改造GFP分子，还是改造GFP基因？________。该工程的基本流程是____________________________。 解析：基因表达载体由4部分组成，分别是目的基因、启动子、终止子、标记基因。把目的基因导入动物受体细胞的常用方法是显微注射技术。由受精卵培养得到早期胚胎，这属于细胞培养技术，可以利用胚胎分割技术由一个胚胎获得多个胚胎。GFP基因不影响目的基因控制合成的蛋白质的结构与功能，且对细胞无毒性，又可以发出荧光，因此可以作为标记基因。蛋白质工程是指通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，获得各种各样的自然界中没有的蛋白质。蛋白质工程的基本流程：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应基因的脱氧核苷酸序列→修饰(合成)相应的基因→表达出相应蛋白质。 答案：(1)GFP基因　终止子　标记基因　显微注射法　早期胚胎培养技术(细胞培养技术)　胚胎分割　(2)标记基因　(3)蛋白质　GFP基因(绿色荧光蛋白基因)　预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应基因的脱氧核苷酸序列→修饰(合成)相应的基因→表达出相应蛋白质 二、细胞工程与胚胎工程中的几个问题 1．单克隆抗体制备中的两次筛选 (1)第一次筛选是将未融合的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及B-B融合的细胞、瘤-瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰，筛选出B-瘤融合的细胞。 (2)第二次筛选是将能产生特定抗体的B-瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为从体内取免疫过的B淋巴细胞有很多种，形成的杂交瘤细胞有很多种，所以需筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。 2．与胚胎移植有关的几条规律 (1)该过程中两次使用促性腺激素，第一次对受、供体进行同期发情处理；第二次用于供体的超数排卵。 (2)该过程中的两次检查：第一次对收集的胚胎进行检查；第二次对受体母牛是否妊娠进行检查。 (3)产下的犊牛性状取决于所用公牛和供体牛，性别取决于公牛提供何种类型的精子，二者与受体牛没有关系。 (4)冲卵的含义是从子宫中冲出胚胎，而非冲出卵子。 3．如何区分试管动物与克隆动物 4.分析克隆动物与供核亲本是否是100%的复制 克隆动物绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外