第18章_基因表达调控_liff_重修.pptVIP

研究重点 每一个特定基因的 顺式作用元件和反式作用因子的相互作用 分解代谢阻遏 单纯乳糖存在时，细菌利用乳糖作碳源；若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在时，细菌首先利用葡萄糖。 葡萄糖对 lac 操纵子的阻遏作用称分解代谢阻遏(catabolic repression) 乳糖操纵子的开放条件（环境因素） 1 当仅有Glc时，乳糖操纵子不开放 2 当有Glc和Lac 时，乳糖操纵子不开放 3 当没有Glc也没有Lac时，不开放 4 只有一种条件可以开放：没有Glc，有Lac：开放 表观遗传（epigenetic inheritance) ： 染色质结构对基因表达的影响可以遗传给子代细胞， 其机制是细胞内存在着具有维持甲基化作用的 DNA甲基转移酶，可以在DNA复制后，依照亲本DNA链的甲基化位置催化子链DNA在相同位置上发生甲基化 启动子 某一特定基因的转录起始点和上游200bp长的DNA序列，可以与反式作用因子结合，起始转录，称为 特点 启动子启动转录 增强子增加转录的频率 启动子必需有转录起始位点 增强子远离转录起始位点 mRNA 其长度一般为20~25个碱基； 在不同生物体中普遍存在； 其序列在不同生物中具有一定的保守性； 具有明显的表达阶段特异性和组织特异性； miRNA 基因以单拷贝、多拷贝或基因簇等多种形式存在于基因组中，大多位于基因间隔区。 miRNA的特点： 是细胞内一类双链RNA(double-stranded RNA，dsRNA)在特定情况下通过一定酶切机制，转变为具有特定长度(21－23个碱基)和特定序列的双链siRNA 双链siRNA参与RISC组成，与特异的靶mRNA完全互补结合，导致靶mRNA降解，阻断翻译过程。 由siRNA介导的基因表达抑制作用被称为RNA干涉(RNA interference，RNAi)。 2．小干扰RNA (small interfering RNA, siRNA) 30bp 双链RNA（dsRNA） 水解生成 21-23nt siRNA 5’ 3’ 3’ 5’ RISC形成 识别特异序列 并使其降解 RNA干扰作用机制 siRNA miRNA 前体 内源长双链RNA诱导产生 内源发夹环结构的转录产物 结构 双链分子 单链分子 功能 降解mRNA 阻遏其翻译 靶mRNA 结合 需完全互补 不需完全互补 siRNA 和miRNA的差异比较 （五）长链非编码RNA在基因表达调控中的作用不容忽视 长链非编码RNA（lncRNA）是一类转录本长度超过200个核苷酸的RNA分子，不直接参与基因编码和蛋白质合成， 可在表观遗传水平、转录水平和转录后水平调控基因的表达。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 二、染色质结构与真核基因表达密切相关 活性染色质 (active chromatin) 具有转录活性的染色质 超敏位点（hypersensitive site) 当染色质活化后，常出现一些对核酸酶（如DNase I）高度敏感的位点 基因被激活的区域染色质对核酸酶极为敏感 转录活化染色质的组蛋白发生改变 组蛋白结构及其化学修饰 （a）组蛋白与DNA组成的核小体；（b）组蛋白的氨基端伸出核小体，形成组蛋白尾巴；（c）四种组蛋白组成的八聚体 组蛋白修饰和组蛋白密码 1 组蛋白的修饰直接影响染色质或核小体的结构， 2 化学修饰征集了其他调控基因转录的蛋白质，为其他功能分子与组蛋白结合搭建了一个平台。这些理论构成了“组蛋白密码”的假说。 组蛋白 氨基酸残基位点 修饰类型 功 能 H3 Lys-4 甲基化 激活 H3 Lys-9 甲基化 染色质浓缩 H3 Lys-9 甲基化 DNA甲基化所必需 H3 Lys-9 乙酰化 激活 H3 Ser-10 磷酸化 激活 H3 Lys-14 乙酰化 防止Lys-9的甲基化 H3 Lys-79 甲基化 端粒沉默 H4 Arg-3 甲基化 H4 Lys-5 乙酰化 装配 H4 Lys-12 乙酰化 装配 H4 Lys-16 乙酰化 核小体装配 H4 Lys-16 乙酰化 Fly X激活 组蛋白修饰对染色质结构与功能的影响 CpG岛甲基化水平降低 CpG岛（CpG island)：CG重复出现，长度约300-3000bp称为CpG岛，存在于整个基因组中，特别是常常位于基因的启动子和第一外显子区域。 CpG岛：C可以被甲基化修饰，它的多少与基因被激活有关 DNA相同，DNA的甲基化不同，基因表达不同 同卵双生子，长相和行为有