蛋白质总结专题知识宣教讲义.pptVIP

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蛋白质总结专题知识宣教;蛋白质的结构与相关功能;;;蛋白质的性质和分离、纯化 ;5蛋白质的颜色反应;6、蛋白质相对分子质量的测定  ;根据分子大小不同的方法 透析和超过滤 利用溶解度差别的纯化方法(实践最常用的方法a盐析b有机溶剂分级分离) 根据电荷不同的纯化方法 (PAGE、醋酸纤维素薄膜电泳、离子交换层析) 利用选择性吸附的纯化方法 利用对配体的特异生物学亲和层析: 一步处理即 亲和力的纯化方法可分离所需蛋白质,纯度很高 ;(一)蛋白质的含量测定 ①凯氏定氮法 ②双缩尿法 ③ Folin-酚试剂法 ④紫外吸收法 ⑤考马斯亮蓝结合法 灵敏度高,重复好 ⑥胶体金测定法 灵敏度最高 (二)蛋白质的纯度测定 电泳、沉降、HPLC和溶解度分析等。;蛋白质实验部分;氨基酸纸层析;相对迁移率 Rf = X/Y  ;考马斯亮蓝结合法测定蛋白质浓度;实验原理;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子质量;电泳过程中有3种物理效应: 样品的浓度效应; 对被分离分子的筛选效应; 电荷效应。 迁移率大小: 分子大小 分子形状 净电荷(荷质比);测定方法;谢谢

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