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第9章 微生物基因表达的调控 酶量的调节:是转录水平及产生多少mRNA或翻译水平及mRNA是否翻译为蛋白酶的调节。 DNA结合蛋白的结构 螺旋—转角—螺旋(HTH) 2、操纵子的转录调控 操纵子(operon) 很多功能上相关的结构基因在染色体 上串连排列,由一个共同的控制区来操纵 这些基因的转录,包括这些结构基因和控 制区的整个核苷酸序列称为操纵子。 负控诱导系统(酶诱导生成机制) 有乳糖时:乳糖作为一种效应物与阻遏物结合 ,使其变构, 不能与O结合,从而转录进行,合成乳糖酶,分解乳糖。 负控阻遏系统(终点产物阻遏机制) 终点产物过量时 正控诱导系统 9.2、代谢调节理论在发酵工业中的应用 人工控制代谢的手段: 改变微生物遗传特性(遗传学方法); 控制发酵条件(生物化学方法); 改变细胞膜透性; 1、酶诱导生成理论在发酵工业中的应用 常用方法: ①在有低浓度诱导剂的化学恒定器中连续培养。 ②用诱导剂和无诱导剂的培养基交替培养。 ③选择碳源。 ④加入诱导酶合成抑制剂。 2、终点产物阻遏理论的应用 氨基酸、核苷酸、维生素等代谢产物的生产中,打破反馈抑制调节是提高产量的重要手段之一。 (1)降低终点产物的浓度。 ①选育终点产物的营养缺陷型菌株。 A a B b C c D d E ②改变微生物膜的透性。 用生理学手段;利用膜缺损突变株 (2)选育抗终点产物阻遏突变株 3、分解代谢产物阻遏理论的应用 4、反馈抑制理论的应用 (1) 选育营养缺陷型菌株 (2) 选育反馈抑制突变株 5、巴斯德效应在发酵工业中的应用6、膜调节理论的应用 * 基因表达:基因的转录和翻译过程,也就是遗传信息表现为生物性状的过程;基因结构是基因表达的基础。 基因表达的调控:多级水平上进行的调控过程;基因活化(DNA水平)、转录水平、转录后加工、mRNA水平、翻译水平、蛋白质水平(加工、修饰、降解)。 (1)非专一性的:蛋白质可以结合到核酸的任何部位。 (2)专一性的 :蛋白质结合到特定序列的核酸部位。 9.1、转录水平的调控 1、DNA结合蛋白 蛋白与核酸的相互作用 蛋白质与核酸的相互作用对于复制、转录、翻译以及这些过程的调控都是非常重要的。这种相互作用一般可分为两种类型: 锌指(zinc finger) 亮氨酸拉扣 (leucine zipper) 模型 DNA上一部分和其上特定基因构成,分成四个区域。R:调节基因;P:启动子;O:操纵基因;S:结构基因。 正调控系统与负调控系统 原核生物的基因调控主要发生在转录水平上,这是一种最为经济的调控。 负调控系统:调节基因产物是阻遏蛋白,效应物与阻遏蛋白结合,阻止基因转录—负控阻遏;效应物不与阻遏蛋白结合,阻止基因转录—负控诱导。 正调控系统:调节基因产物是激活蛋白;效应物使激活蛋白处于激活状态—正控诱导;效应物使激活蛋白处于非活性状态—正控阻遏。 无乳糖时:细胞内产生的阻遏物结合在操纵基因上,转录不能进行。 R P O S mRNA 阻遏蛋白有活性 RNA聚合酶 不转录 (1)体系无诱导剂时 R P O S mRNA RNA聚合酶 阻遏蛋白有活性 诱导剂 没活性 转录 转译 酶蛋白 (2)体系有诱导剂时 终点产物不过量时 (1)终点产物不过量时 mRNA 阻遏调节蛋白无活性 R P O S RNA聚合酶 酶蛋白 转录 转译 (2)终点产物过量时 R P O S mRNA 阻遏调节蛋白无活性 RNA聚合酶 终点产物 有活性 不转录 负控诱导与正控诱导两种操纵子转录调控的差异 (1)调解基因的产物在负控中是阻遏蛋白,在 正控中是激活蛋白。 (2)阻遏蛋白的结合位点是操纵区,激活蛋白 的结合位点是激活蛋白结合位点。 分解代谢阻遏调控 有葡萄糖时:——— cAMP的产生受葡萄糖抑制。葡萄糖降解物抑制腺苷酸环化酶的活性,cAMP浓度下降,cAMP不与CAP结合,RNA多聚酶不能结合, 转录不能进行。 无葡萄糖时:——— cAMP浓度上升,cAMP与CAP(降解物的激活蛋白)结合,与启动基因结合,转录进行. 工业发酵的目的:大量积累人们所需要的微生物代谢产物。 代谢的人工控制:人为地打破微生物的代谢控制体系,使代谢朝着人们希望的方向进行。 微生物
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