无创产前筛查.pptVIP

重大出生缺陷无创产前筛查 内容提要 常见染色体疾病概述 染色体非整倍体病发病机理 传统产前筛查与诊断技术介绍 无创产前项目工作流程 四 一 二 三 一、染色体非整倍体概述（唐氏综合征为例 ） BRCA1 7世纪 考古学家挖掘出典型唐氏综合征体征颅骨。 素描画中见到具有唐氏综合征样面容的儿童。 John Langdon D own 医生第一次对唐氏综合征的典型体征进行完整的描述并发表。 Down’s syndrome. 法国遗传学家(Jerome LeJeune)发现唐氏综合征是由人体的第21号染色体的三体变异造成的现象。 16世纪 1866年 1959年 染色体非整倍体疾病临床表现 21、18、13-三体综合征是人类最常见的三种染色体疾病，患儿面容特殊，绝大多数为严重智力障碍及器官畸形，对家庭和社会造成巨大危害和负担。现代医学对胎儿染色体疾病尚无有效治疗方法，最好的方法是在孕期通过产前筛查及诊断，发现异常并及时采取相应措施 21三体核型分析图 21三体形成原因 21三体发病率与产妇年龄关系 三、现有的产前筛查与诊断手段 产前筛查 母血清学筛查 颈项透明膜厚度筛查 产前诊断 羊水穿刺 绒毛取样 脐静脉穿刺 风险计算 侵入性诊断方式 传统筛查方式的缺陷 产前筛查（S）100,000 筛查结果阳性（SP）7,000 筛查结果阴性（SN）93,000 唐氏综合征胎儿 400 真阳性 （TSP） 340 假阴性 （FSN） 60 非唐氏综合征胎儿 99,600 假阳性（FSP） 6,660 真阴性 （TSN） 92,940 英国的统计显示，1996-2002年全国因羊水穿刺导致的抬儿流失数为5619名 无创产筛技术原理的提出 胎儿DNA来源和特点 来源： 1 胎儿细胞通过胎盘渗透到母血中，被母体免疫系统破坏，胎儿DNA残留下来； 2 胎儿细胞凋亡； 3 胎盘滋养层细胞的凋亡 基本特点： 1 含量有一定的变化规律。妊娠第4周开始可检出胎儿游离DNA，随着孕周增加而增加，存在个体差异，平均浓度。 2 分娩后短时间内消失，平均半衰期为16.3min (4-30min)， 2h就无法检出。再次妊娠不影响检测结果。 3 DNA片段较小，平均166bp左右。常规技术很难检测 母体和胎儿ＤＮＡ的混合物 Unique reads (单一序列读取 ）: no mismatch, one location 母血浆DNA+高通量测序 以21-三体为例：100 DNA单位 /毫升血浆。其中，95个单位来源于母亲， 5个单位来源于胎儿 母亲 Chr 21： 95×2=190 正常胎儿 Chr 21： 5×2=10 母体外周血中 Chr 21=190+10=200 21-三体胎儿 Chr 21： 5×3=15 母亲 Chr 21： 95×2=190 母体外周血中 Chr 21=190+15=205 通过大规模并行测序，获得分布在每条染色体上的真实的核酸片段数量，经过计数与比较： 正常胎儿 或者 21-三体胎儿 无创产前基因检测流程 医 院 枫林龙鼎实验室 10-13.5周 早孕期筛查(检出率85%) 中孕期筛查 (检出率81%) 15-20周 16-22周 羊水穿刺 （流产率0.5-1%） 24-28周 脐带血取样 （流产率1-3%） 12-24周 无创产前基因检测 （准确率99%） 无创产检的优势 适应症和禁忌症 适应症： 1、经B超确认的单胎、活胎孕妇 2、孕周在12周至24周之间 3、可同时检测18三体，13三体，45,X，47,XXY， 47,XYY，47,XXX等多种染色体非整倍体疾病 禁忌症： 1、双胎或多胎 2、孕妇本人是染色体非整倍体患者 3、孕妇接受过异体输血、移植手术、干细胞或免疫细胞 治疗 抽取孕妇外周血5 mL，采用 EDTA 抗凝； 采血完毕后，轻微颠倒采血管4次，并及时将采血管放置于4℃冰箱中，在4小时内进行血浆分离工作。 【注意事项】 采血时孕妇无需空腹； 采血管为 5 mL EDTA 抗凝管。做7项检测需要用10ml抗凝管； 颠倒混匀时动作不能太剧烈，防止溶血。 样本采集 1、将采血管在4 ℃环境下 1600转/分离心10分钟，上清（血浆）分装到置于冰盒上