天然药物活性成分.ppt

大孔吸附树脂法 主要用于水溶性化合物的提取分离。 大孔吸附树脂（吸附性与范德华力、氢键有关） 大孔吸附树脂类型 影响因素：1.分子极性大小；2.分子体积大小；3.pH值的影响。 预处理与再生 大孔吸附树脂的特点 吸附性和筛选性相结合的分离材料 选择性好 吸附容量大 机械强度高 再生处理方便 吸附速度快 解吸容易 不易受到无机盐等离子或小分子化合物的影响 大孔吸附树脂类型 非极性吸附树脂（芳香族吸附剂）：以苯乙烯为单体，二乙基苯为交联剂。 中极性吸附树脂（脂肪族吸附剂）：以甲基丙烯酸酯作为单体和交联剂。 极性吸附树脂：结构中含有硫氧、酰胺、氮氧等极性基团。 预处理与再生 预处理：水洗、溶胀后用甲醇或95%的乙醇浸泡24小时，至洗涤液加水后不呈白色浑浊，最后用蒸馏水洗掉有机溶剂。 再生：蒸馏水、甲醇、乙醇反复洗涤，必要时可用3%的盐酸水溶液或3%的氢氧化钠溶液再生。 凝胶色谱法（GFC） 原理：“分子筛” 凝胶的种类 1.葡聚糖凝胶（Sephadex G） 2.羟丙基葡聚糖凝胶（LH-20） 气相色谱法：适用于沸点低，易挥发，对热稳定的化合物的分离。 HPLC 电泳技术 结构测定 (一)鉴定天然产物化学成分的一般步骤 1.化合物纯度测定 2.初步推测化合物类型 3.测定分子式、计算不饱和度 4.确定官能团或结构片断 5.确定分子的平面结构 6.确定分子的立体结构 (二)结构测定中波谱知识回顾 纯度测定方法 1.结晶的性质 2.层析行为（PC、TLC） 3.GC 4.HPLC 5.电泳 …… 分子式测定方法、不饱和度的计算 分子式测定方法（MS）： 1.元素定性分析 2.高分辨质谱法（HR-MS) 不饱和度的计算 U=(2+2n4+n3-n1)/2 例1：元素定性分析 定量分析结果：C：79.35%，H：10.21% 所以，O=100-79.35-10.21=10.44% 三元素在结构中所占比例为： C=79.35/12.01=6.61 10.16 H=10.21/1.008=10.13 15.58 O=10.44/16.00=0.65 1 分子式为（C10H16O1）n 如MS的分子离子峰为456，则n=3 例2：高分辨质谱法 以12C=12.000000为基准，1H=1.007825 14N=14.00307，16O=15.99491 故：C8H12N4 164.1063 C9H12N2O 164.0950 C10H12O2 164.0837 C10H16N2 164.1315 分子量均为164，但精确质量不一样，可用于区别化合物。 常用波谱知识回顾 紫外光谱(UV) 红外光谱(IR) 核磁共振(NMR) 质谱(MS) 练习 紫外光谱 用不同波长的紫外光为光源（200~400nm），依次照射一定浓度的样品溶液，分别测定其吸光度（A），并用波长对吸光度（或摩尔吸光系数）作图，得紫外吸收光谱图。 应用：定性鉴别、纯度检查、单组分的定量分析以及结构解析（辅助手段）。 只能显示分子中部分结构的特征。 可鉴定的结构片断 某种发色团的存在； 顺反异构体的鉴定； 吸收带 R带：杂原子的不饱和基团，波长270nm,弱吸收；可随溶剂极性的不同而移动。 K带：共轭结构，强吸收。 B带：芳香化合物，似掌状，256nm左右，弱吸收。 E带：芳香化合物，强吸收，可分为E1（180nm)和E2(200nm)两个峰。 红外光谱 广泛用来鉴定化合物的结构，简单迅速，可靠。 用波长2.5-15um（4000-667cm-1）的光波为光源依次照射样品，以波数（或波长）为横坐标，百分透光度为纵坐标绘制的谱图。 与紫外光谱的区别： IR为振动-转动光谱 适用范围广 特征性强 IR的九个重要区段： 3750~3000cm-1 : -OH,-NH 3300~3000cm-1 : ≡CH,=CH,Ar-H 3000~2700cm-1 :饱和CH,-CHO 2400~2100cm-1 :-C≡C,-C≡N 1900~1650cm-1 :C=O 1675~1500cm-1:C=C,C=N 1475~1300cm-1:CH 1300~1000cm-1:C-O(酚、醇、醚） 1000~650cm-1：=CH 影响峰位的因素 诱导因素：如吸电子诱导效应使峰向高频方向移动。 共轭因素：使峰向低频方向移动。 氢键：使峰向低频方向移动。 核磁共振 用60cm~300m波长的无线电波照射样品，只能引起原子核的自旋能级的跃迁。 1H-NMR、13C-NMR、二维核磁共振谱 （N+1)律 峰位：烷基H ~1ppm，ArH ~7ppm等。 质谱 主要特点： 灵敏度高 分析速度快 测定对