第六章发酵染菌.pptVIP

发酵过程中除了生产菌以外，还有其它菌生长繁殖，如果这些杂菌的生长失控，就会造成发酵染菌。 几乎所有的发酵工业，都有可能遭受杂菌的污染。染菌的结果，轻者影响产量或产品质量，重者可能导致倒罐，甚至停产。 种子培养异常 主要表现有菌体生长缓慢、菌丝结团、菌体老化以及培养液 的理化参数变化。 发酵异常 主要表现在菌体生长速度缓慢，形态不粗壮或过早老化，以 及糖、氮、pH、泡沫、发酵产物、发酵浓度等理化参数不正 常。 举例：其他杂菌污染的影响 青霉素发酵：污染细短产气杆菌比粗大杆菌的危害大 链霉素发酵：污染细短杆菌、假单孢杆菌和产气杆菌比粗大杆菌的危害大 四环素发酵：污染双球菌、芽孢杆菌和夹膜杆菌的危害较大 3、判断发酵是否染菌应以无菌试验结果为根据 无菌试验的目的： 发酵过程的杂菌检查 2、从染菌的时间来分析 发酵早期染菌：种子带菌、培养基和设备灭菌不彻底、设备或管道有死角； 中、后期染菌：中间补料、设备渗漏、操作不合理。 3、从染菌的类型来分析 耐热性芽孢杆菌：死角或灭菌不彻底； 球菌、酵母：可能是从蒸汽的冷凝水或空气中带来的； 浅绿色菌落(革兰氏阴性杆菌) ：发酵罐的冷却管或夹套渗漏 霉菌：灭菌不彻底或无菌操作不严格。 第六章 发酵染菌及防治 第一节 发酵过程中的染菌分析 第二节 发酵染菌的预防措施 第三节 发酵染菌后的处理 第四节 预防噬菌体的危害 无菌室立体示意图 1、设备渗漏的原因 ---发酵液中腐蚀性物质对设备的腐蚀 ---磨蚀 发酵液中固体物料因搅拌桨的搅动与冷却管摩擦而引起管外壁磨损 冷却介质和加热时蒸汽的冲击，引起管内壁的磨损 ---设备加工不良 弯管时，弯头处管壁变薄 焊接不良 2、盘管渗漏的防止 放罐后认真清洗发酵罐 控制冷却水质量，降低其中氯离子含量 对盘管定期检查，试漏，及时发现漏隙 空气分布管渗漏的防止 试漏方法 气压试验 ：先在发酵罐内放满清水，用压缩空气通入管子，观察水面有无气泡产生以确定管子有否渗漏和渗漏的部位。 水压试验 ：用手动泵或试压齿轮泵将水逐渐压入冷却管，泵到一定压力时，观察管子有否渗漏现象 3、罐体渗漏的防止 4、管件的渗漏 阀门与管件：与发酵罐相连接的管路很多，有空气、蒸汽、水、物料、排气、排污等管路，管路多，相应的管件和阀门也多。管道的连接方式、按装方法以及选用的阀门形式对防止污染有很大的关系。所以，与发酵有关的管路不能同一般化工厂的化工管路完全一样，而有其特殊的要求。 维持罐 例:接种管路的死角 种子罐利用压力差将其中培养好的种子输入发酵罐，其中 连接管路的灭菌是与发酵罐同时进行 不合理补料管配置造成的死角 压力表安装不合理形成的死角 排气管的死角 罐顶排气管弯头处如有堆积物，其中窝藏的杂菌不容易彻底消灭，而当发酵时受搅拌的震动和排气的冲击就会一点点地剥落下来造成污染。另外排气管的直径太大，灭菌时蒸汽流速小也会使管中部分耐热菌不能全部杀死。所以排气管要与罐的尺寸有一定比例，不宜过大或过小。 五、防止操作不当引起的染菌 为防止染菌，有关人员要严格按规程操作，特别是补料、取样、接种等。对罐压力的降低，泡沫顶盖，发酵液倒流过滤器等情况应严格操作与管理。 第六章 发酵染菌及防治 第一节 发酵过程中的染菌分析 第二节 发酵染菌的预防措施 第三节 发酵染菌后的处理 第四节 预防噬菌体的危害 1、发现染菌后的挽救措施 为了减少损失，对被污染的发酵液要根据具体情况采取不同的挽救措施。 如果种子培养或种子罐中发现污染，则这批种子就不能再继续扩大培养，因为此时的损失毕竟是很小的。 发酵早期染菌可以适当添加营养物质，重新灭菌后再接种发酵。中后期染菌，如果杂菌的生长将影响发酵的正常进行或影响产物的提取时，应该提早放罐。 在染菌的发酵液内添加抑菌剂(如小剂量的抗菌素或醛类)用以抑制杂菌的生长也是一种办法。抑菌剂要事先经过试验，确实证明不妨碍生产菌的生长和发酵才能使用。 因而不是所有发酵都能使用抑菌剂。另外，采用加大接种量的办法，使生产菌的生长占绝对优势排挤和压倒杂茵的繁殖，也是一个有效的措施。还有将种子罐中种子培养好后，进行冷冻保压(1.5公斤/厘米2，10℃左右)，经平板检查证明无杂菌后，再接入发酵罐发酵，这一措施在一些谷氨酸发酵生产工厂取得很好效果。 2、有时发酵罐偶而染菌，原因一时又找不出，一般可以采取以下措施： (1)连续灭菌系统前的料液贮罐在每年4一10月份(杂菌较旺盛生长的时间)加入0.2%甲醛，加热至80℃，存放处理4小时，以减少带入培养液中的杂菌数。 (2)对染菌的罐，在培养液灭菌前先加甲醛进行空消处理。甲醛用量每立方米罐的体积0.12~0.1