植物组织培养之具体.ppt

植物组织与器官培养 植物组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞、胚胎、原生质体等培养在人工配置的培养基上，给予适当的培养条件，诱发产生愈伤组织、潜伏芽，或者长成新的完整植株的一种实验技术。 植物器官培养：将植株上的各种器官从母体上分离出来，放在无菌的人工环境中让其进一步发育，最终长成幼苗的过程。 植物离体无性繁殖 简称离体繁殖（in vitro propagation)、微型繁殖（micropropagation)，是指利用离体培养技术将来自优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞进行离体培养，并在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法（技术）。 用这种方法得到的植株群体来自一个单株（或一个单芽），它们遗传组成相同，这些株群可称单株无性系。 植物离体无性繁殖的意义（优越性） 植物离体无性繁殖的方式 器官发生型(organogenesis type) 胚状体发生型(embryogenesis type) 不定芽型（adventitious bud type) 器官型(organ type) 原球茎型(protocorm type) 球茎芽型 块茎型 鳞茎型 孢子型 根茎型 微枝扦插型 器官发生型(organogenesis type)： 诱导器官外植体产生愈伤组织，经分化培养形成芽、根再生成植株的方式。 技术关键：外植体诱导产生的愈伤组织要早期挑选，使其来源尽量一致。 特点：繁殖速度快；培养经愈伤组织阶段再生成植株，遗传性不稳定，易产生变异。 芦荟组织培养快速繁殖 材料和培养基 10～15cm高的芦荟幼苗 愈伤组织诱导培养基 MS＋(1-6mg/L)BA+(0.1-0.5mg/L)NAA 分化培养基 MS＋(2-4mg/L)BA+(0.1-0.5mg/L)NAA 生根培养基 MS＋(0.1-0.5mg/L)IBA+(2-5mg/L)多效唑 繁殖方法 愈伤组织培养 外植体：茎尖 外植体消毒：酒精＋升汞 培养基：愈伤组织诱导培养基 培养条件：温度 25±2℃ 光照 1000~2000lx 10~12h/d 培养时间 15～25d （形成愈伤） 繁殖方法 继代培养 种子 愈伤切块 培养基及条件 同愈伤组织培养 培养时间 10～30 分化培养 种子 愈伤切块 培养基 分化培养基 培养条件 同愈伤组织培养 培养时间 30～50d （出芽，叶） 生根培养 材料 3cm高的幼苗 培养基 生根培养基 培养条件 同愈伤培养 培养时间 15d 炼苗 选材 苗高5～10cm，健壮 清洗培养基，喷水 条件 15 ℃～25℃，60％～80％湿度，12～24h 移栽 移入驯化苗圃（蛭石组成） 15～20d 移入苗圃 胚状体发生型(embryogenesis type)： 指植物器官、组织和细胞外植体经培养脱分化形成胚状体再成苗的方式。 技术关键：提高不同外植体胚状体发生及萌发率和提高胚状体同步化率。 特点：胚状体发生数量多、速度快、结构完整，繁殖系数高；遗传性稳定。 不定芽型（adventitious bud type)： 选取具有顶芽和腋芽的短枝无菌培养，诱导芽萌发成苗或增殖产生许多不定芽发育成苗，将新萌生的枝条再转接继代，重复芽到苗的增殖过程，最后使其生根形成植株的方式。 技术关键：打破顶端优势，促使腋芽增殖并促其生根。 特点：繁殖率高、保持物种的遗传稳定性，多用于林木的繁殖。 器官型(organ type) 指直接从茎、叶、鳞片等外植体上诱导不定芽或带芽的休眠器官（如小鳞茎、小球茎、小块茎）产生再生成植株的方式。 技术关键：对培养基要求高，控制好激素浓度，避免愈伤组织发生。 优点：繁殖率高，速度较快；遗传性稳定。 原球茎型(protocorm type) 兰属特有的方式，即外植体经培养产生原球茎，再直接长成植株。 块茎型 叶片或叶柄上形成粒状芋块，进一步分化出芽和根 块茎芽可为繁殖系母体，不断切割繁殖移栽，成活率高 。 花叶芋 鳞茎型 鳞片近轴面或边缘直接形成带根的小鳞茎 在试管内形成小鳞茎需较长时间 百合 郁金香 孢子型 用成熟或未成熟的孢子进行培养 孢子繁殖最困难的是表面消毒，萌发时间较长 地钱 根茎型 蕨类具有横向的茎及直立的短根茎，为组织培养的最佳外植体 根状茎上产生蕨叶及根，繁殖速度较孢子型快 肾蕨等 植物离体培养脱毒技术 病毒在植物体内的分布及危害 植物脱病毒方法 脱毒植物检测及保存 病毒的特性及其对植物的危害 大多数植物病毒不经种子传播； 无性繁殖的植物，都易受到一种或多种病毒的侵染。 病毒在植物体内的分布 病毒在植物体内的分布具有不均匀性，随植株不同部位和年龄而异。 老叶和成熟组织及器官中病毒含量