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- 2019-09-29 发布于湖北
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湖南长郡卫星远程学校 2012年下学期 制作 03 (1)目的基因的获取 ①目的基因:编码蛋白质的结构基因。 ②目的基因的获取途径 a.从自然界中已有的物种中分离出来,如可从基因文库或cDNA文库中获取。 一、基因工程的操作步骤 b.人工合成目的基因:根据已知的核苷酸序列,利用原料以化学方法合成。常用的方法有反转录法和化学合成法。 c.利用PCR技术扩增目的基因 通过PCR技术可对已获取的目的基因进行扩增,以获取大量的目的基因。 (2)基因表达载体的构建(基因工程的核心) ①目的: 使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可遗传给下一代,并能够表达和发挥作用。 基因表达 载体组成 ② 目的基因 启动子:为RNA聚合酶识别和结合部位,驱动转录mRNA 终止子:使转录终止的特殊结构的DNA片段 标记基因:可鉴别受体细胞是否含有目的基因 ③过程 (3)将目的基因导入受体细胞 ①导入原理:借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。 ②导入过程 转化过程 受体细胞 常用方法 微生物细胞 动物细胞 植物细胞 生物种类 农杆菌转化法(主要)、基因枪法和花粉管通道法 显微注射技术 Ca2+处理法 体细胞 受精卵 原核细胞 将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物
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