食品微生物检测技术现状及发展趋势分析.doc

检查 食品微生物检测技术现状及发展趋势分析 　　摘要：随着我国经济的快速发展，人们的生活水平逐渐提高，人们越来越关注食品安全问题，所以关于食品加工中的微生物污染受到人们的普遍重视。我们不但要重视应用先进的检测技术，还要重视提高检测人员的操作水平，运用先进的检测设备和检测试剂，使检测的各项指标都要达到标准。本文主要论述了当前的食品微生物检测技术，预测了技术的发展情况。 　　关键词：食品 微生物检测 现状 发展 　　中图分类号：TS207 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2014）02-0037-02 　　现阶段，食品微生物检验技术越来越先进，并且仍以较快的速度进行发展，在将来的发展中，各种技术手段一定会逐步得到完善，微生物检测技术不仅只应用于食品微生物的检测方面，而且还会逐步应用于公共卫生、疾病预防等方面，对保障人类的身体健康发挥重大作用。 　　1 食品微生物检测技术现状 　　在食品当中，与人体健康紧密相关的主要卫生指标有：菌落总数、大肠菌群和致病菌，检测这些指标，可以衡量一个企业的管理水平。假如检测中有一项指标存在不合格现象，则就能断定此样品不合格。反映食品新鲜程度的指标有菌落总数和大肠菌群，同时可以得出食品原料是否变质，从侧面可以看出食品生产的卫生情况，所以可以据此反映食品的卫生质量。 　　在食品检验中，一般检测过程有：菌落总数计数、大肠杆菌群计数、常见致病菌检验。一般运用的检验办法有：微生物形态检查、生化试验、噬菌体分型、血清学分型、毒性试验以及血清试管凝聚试验等。一般情况下应用的试验有：糖酵解试验、淀粉水解试验、甲基红试验、V-P试验、硝酸盐还原试验、明胶试验等。虽然利用这些传统检测办法也可以达到检测目的，但确实存在很多缺陷，如试验数量多、不易操作、需要时间长等。 　　2 食品微生物检测新型技术及发展 　　2.1 重量分析稀释计、自动旋转平板、激光菌落计数 　　运用重量分析稀释计能够准确完成稀释液的制作。依据多次试验得到的数据，可以得到，如果稀释比率在1∶1到1∶100时，稀释结果将会非常准确，有时甚至可以达到百分之百。利用这种仪器，可以将稀释和称量当中的误差降到最小，使计算过程变得简单，所以节约了大量的试验时间。在试验中利用自动旋转平板技术，可以使实验操作更加规范，它的工作原理是把液体样品运用螺旋方式分布，由于平板的旋转，可以使液体向平板的边缘移动，保证样品分布更加均匀。这种实验方法广泛应用于细菌、酵母、霉菌及乳类样品中。在样品倒入平板后，可以利用激光菌落计对菌落数进行计数。利用电子技术进行计数，代替了传统的视觉计数，提高了计数质量，并且可以节省大量的实验时间，减少实验误差。 　　2.2 聚合酶链式反应（PCR）技术 　　在对食品当中含有的微生物进行检测时，首先要设置高温环境，使蛋白质改变性质，使DNA双链解旋改变为单链，然后马上进行降温，使每条DNA单链退火，然后再升温使DNA复制。循环利用这种方法，一般要达到21-31次，可以将一分子的DNA增加到110个分子。完成此类检测的全部过程一般需要一小时。如果依据理论研究，利用PCR技术在极短的时间内就可以检测到食品样品中含有病原菌的数量，即使只含有1分子病原菌的DNA也可以准确的检测出来。利用这种检测方法只需很短的时间，并且具有很高的灵敏度和特异性，只需少量检测成本，但存在的缺点是容易使PCR产品受到污染，所以必须进行规范操作。利用PCR技术，可以准确检测食品中的沙门氏菌、痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、肉毒梭菌、乳酸杆菌、大肠杆菌O157∶H7、产单核细胞李斯特菌及大部分致病菌。 　　在传统PCR技术基础上，创新发展了实时定量PCR技术，两者的基本原理一致，但定量技术原理不一致。为了保证实时定量技术的特异性能，在实时定量技术中应用了荧光染料和探针，并且荧光信号的强弱程度和扩增产物的数量同比增长，所以能够保证定量准确。运用这种技术，可以检测基因突变、基因表达、检测转基因食品等，具有的优点是：灵敏度高、重复性好、成本低等。 　　2.3 酶联免疫吸附法 　　这种方法是一种固相酶免疫分析方法，在固相载体表面吸附特定抗原或抗体之后，酶标记物可以和对应的抗体或抗原结合形成酶标记抗原/抗体复合物，假如遇到相应底物，则结合物上的酶催化底物就会发生水解、氧化或还原反应，生成肉眼能够观察到的有色物质，依据颜色的深浅不同进行定性、定量，来检测对应微生物。运用这种方法，可以大量节省检测时间，一般可以缩短4到5天，可以说速度很快。 　　2.4 免疫磁珠技术 　　这种技术将抗体包被的磁珠作为载体，使抗体和特异性抗原结合，形成抗原-抗体复合物，在外部加以磁场的前提下，会产生定向移动现象，使抗原分离。这种技术具有固相化试剂的优点，同