生化分离工程5亲和纯化.pptVIP

5. 亲和纯化 生物亲和作用 亲和色谱 膜亲和过滤法 亲和双水相萃取 亲和反胶团萃取 亲和沉淀 磁性亲和分离 5.1 生物亲和作用 生物亲和作用的本质 影响亲和作用的因素 亲和作用体系 5.1.1 生物亲和作用的本质 生物分子间的这种特异性相互作用称为生物亲和作用（bioaffinity）或简称亲和作用（affinity）。 利用生物分子间的这种特异性结合作用的原理进行生物物质分离纯化的技术称为亲和纯化（affinity purification）。 亲和作用的分子（物质）对可以是：大分子-小分子，大分子-大分子，大分子-细胞，细胞-细胞。 具有亲和作用的分子对之间具有“钥匙”和“锁孔” 的空间结构关系。 亲和结合作用，至少存在3个对应官能团相结合： 静电作用 氢键 疏水相互作用 配位键 弱共价键 5.1.2 影响亲和作用的因素 1. 离子强度 离子强度影响静电引力、氢键作用、疏水相互作用等。 2. pH ?-羧基的pKa＝3.4～3.8 ?-羧基的pKa＝3.9～4.0 ?-氨基的pKb＝7.4～7.5 ?-氨基的pKb＝10.0～10.4 3. 抑制氢键形成的物质 脲和盐酸胍（guanidinohydrochloric acid）的存在可抑制氢键的形成。 4. 温度 温度升高，静电作用、氢键及金属配位键减弱；疏水性相互作用增强 。 5. 离液