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- 2019-10-11 发布于广西
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血清谷丙转氨酶活性的测定(King法) 【目的要求】 1.掌握血清谷丙转氨酶活性测定的基本原理。 2.熟悉血清谷丙转氨酶活性测定的具体操作方法。 3.了解血清谷丙转氨酶活性测定的临床意义。 【原理】 生物机体内转氨基作用是α-氨基酸的氨基通过酶促作用转移到α-酮酸的酮基位置上,生产相应的酮酸和氨基酸的化学反应。催化这反应的酶称为转氨酶(transaminase),其辅酶为磷酸吡哆醛。转氨酶广泛存在于机体的各种组织中,在肝、心、肾等组织中的谷丙转氨酶(glutamic pyruvic transaminase , GPT),谷草转氨酶(glutamic oxalacetic transaminase , GOT)活性较高。在正常的新陈代谢过程中,血清内维持一定水平的转氨酶活性(即正常值)。当肝、心、肾等组织发生病变时,由于组织细胞肿胀,坏死导致大量的酶释放至血流中,从而引起血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)活性显著升高。因此测定这些酶的活性对某些疾病的临场诊断具有重要的参考价值。 血清中的谷-丙转氨酶(ALT),在37℃、pH7.4的条件下,可催化基质(底物)液中的丙氨酸与α-酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸: 生成的丙酮酸可与起终止和显色作用的2,4二硝基苯肼发生加成反应,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,进而在碱性环境中生成红棕色的苯腙硝醌化合物,其颜色的深浅在一定
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