第二章 核酸化学.ppt

第四章 核酸化学;什么是核酸？;1928年 Grifths（英国）的肺炎双球菌转化实验 ——证实核酸作为遗传物质;;;;;;核酸特别是DNA的主要作用;②DNA的组成差异决定了细胞中所有蛋白质、RNA的结构特征;Clone—克隆，人工操作下的细胞无性繁殖过程。;克隆人;克隆人的方法;2. 卵细胞去核并与体细胞融合;4.克隆婴儿的诞生;为什么各国政府均反对克隆人呢？;核酸分为两大类： 脱氧核糖核酸（DNA） Deoxyribonucleic Acid 核糖核酸（RNA） Ribonucleic Acid;核酸的化学组成;磷酸;一、核糖与脱氧核糖;DNA含β-D-2’-脱???核糖 RNA含β-D-核糖; ; 嘌呤环;嘌呤碱;（2）嘧啶碱;碱基具有芳香环的结构特征。 嘌呤环和嘧啶环呈平面或接近于平面结构 ;;三、核苷 C’1 – N9 (嘌呤碱) C’1 – N1 (嘧啶碱) ;N;N;核苷 nucleoside;磷酸;;核苷酸;核糖可形成 2’、3’、5’ - 核苷酸 脱氧核糖可形成3’、5’ - 核苷酸 一般来说核苷酸就是指5’-核苷酸;八种单核苷酸;五、游离核苷酸及其衍生物 1、多磷酸核苷酸 2、环化核苷酸 3、辅酶类核苷酸;生物体内分布最广和最重要的一种核苷酸衍生物。;ATP的性质;第二节 核酸的一级结构;（1）核苷酸间以3′-5′磷酸二酯键相连 （2）一端称为5′-磷酸端（5’-P表示） 一端称为3′-羟基端（3’-OH表示） （3）多聚核苷酸链具有方向性，表示时， 需注明方向：5′→3′或是3′→5′;DNA/RNA一级结构的简写形式;一、 DNA的一级结构 ——DNA分子上核苷酸的排列顺序 ;二、RNA的一级结构;核糖核苷酸通过磷酸二酯键相连形成的长链 —— RNA的一级结构;1. DNA的碱基组成： 具有生物种的特异性： 不同物种DNA有其独特的碱基组成； 同一物种不同组织/器官/DNA碱基组成一样， 不受生长发育、营养状况及环境条件的影响。 ;（一）DNA的二级结构;1.DNA碱基互补原则;;2. Chargaff定则/碱基等比定律： 嘌呤总数等于嘧啶总数 A+G=C+T； 6位上含氨基的碱基= 6位上含羰基的碱基； A+C=G+T 腺嘌呤和胸腺嘧啶的摩尔数相同 A=T， 胞嘧啶和鸟嘌呤的摩尔数相同 C=G DNA分子的碱基组成具有种属特异性，而不具有组织器官特异性 ;3.二级结构—B型双螺旋结构;DNA，双螺旋，正反向，互补链。 A对T，GC连，配对时，靠氢键， AT2，GC3，十碱基，转一圈，螺距34点中间。 碱基力和氢键，维持螺旋结构坚。 （AT2，GC3是指之间二个氢键GC间三个.螺距34点中间即3.4） ;; ;双螺旋结构的稳定因素;三、 DNA的高级结构;DNA的存在形式;（二）原核生物以及真核生物细胞器环状DNA的超螺旋三级结构;固定;一、RNA的类别及分布 主要存在于细胞质中（90%） 负责遗传信息的翻译和表达 分子量比DNA小得多;二、mRNA (信使RNA);3、 mRNA分子特点 ;polyA可能有多方面功能： 与mRNA从细胞核到细胞质的转移有关； 与mRNA的半寿期有关， 新合成的mRNA, polyA链较长;② 5’ -末端有一个甲基化的鸟苷酸： “帽结构 ”;2、tRNA (转移RNA);（一）tRNA的二级结构 ①氨基酸臂：由7对bp组成，富含G， 末端为CCA，接受活化AA ②二氢尿嘧啶环：由8－12核苷酸组成 ③反密码环：识别密码子 ④额外环：是tRNA分类的重要指标 ⑤假尿嘧啶核苷-胸腺嘧啶核糖核苷环 （T Ψ C环）;tRNA的三级结构;（二）tRNA的三级结构;;约占全部RNA的80% 是核糖核蛋白体的主要组成部分 功能与蛋白质生物合成相关 ;rRNA结构特点;;;;rRNA的高级结构 核糖体：rRNA+蛋白质 催化肽键合成的是rRNA ， 蛋白质维持rRNA构象，起辅助作用;细胞核RNA;一、核酸的降解;核酸的水解（酸解和碱解）;1、碱水解 0.3 M NaOH溶液中: RNA磷酸酯键被水解生成2’/3’ -核苷酸 DNA则不受影响 无2’－OH不形成碱水解中间产物 ;;2、酸水解 糖苷键比磷酸酯键更易被酸水解； 嘌呤碱比嘧啶碱的糖苷键对酸更不稳定； 对酸最不稳定的：嘌呤与脱氧核糖间糖苷键 DNA在pH2.8、100℃加热1h，可除去嘌