第1部分实验指导.PDFVIP

第1部分  实 验 指 导 1 第 1 实 验 指 导分 部 实验一　最大耐受量/ 最大给药量实验 【实验目的】 1．掌握最大耐受量实验测定的基本方法。 2 ．熟悉动物实验的基本操作技术，掌握小鼠尾静脉注射法。 【实验原理】 最大耐受量是指动物能够耐受的且不引起动物死亡的最高剂量。对于某些低毒的受试物 可采用最大给药量法进行药物的急性毒性试验，即最大给药量实验。指在合理的最大给药浓 度及给药容量的前提下，以允许的最大剂量给予实验动物，观察动物的反应，估计其能达到 人用量的多少倍，从而对其安全性做出评估，为临床用药提供参考，也为开展药效学的研究 提供科学依据。 【实验对象】 小白鼠，体重18～22 g ，雌雄各半。 【实验药品】 乌头煎剂 （约10% ）。 【实验器材】 鼠笼，动物天平，1 mL 注射器，钟罩，酒精棉球。 【实验步骤】 1．预备实验：用少量动物逐步摸索一个动物不死亡的最大剂量。方法是根据经验或文献 定出一个估计量，观察2～3 只动物的死亡情况。如全死，则降低剂量；如全不死，则加大剂 量再行摸索，直到找出一个动物不死亡的最大剂量。 2 ．正式实验 （1）动物选择：小白鼠。可根据不同实验选择动物，应选择对被试因素敏感的动物。同 时也应考虑动物来源、经济价值及操作简便等条件。急性毒性实验常以小白鼠为实验动物。 （2 ）给药途径：尾静脉注射。根据拟临床实验的给药途径进行选择。 （3 ）给药剂量：药物最大浓度，最大给药容积的剂量给药1 次。 药物毒理学实验指导和习题集 2 （4 ）观察时间：实验观察1 小时。注：实际需连续观察7～14 天，详细记录动物反应情 况。在观察期间应注意保证食物、水、温度等生活条件，严防非被试因素引起的死亡。 （5 ）计算出总给药量 （g/kg ），并推算出相当于临床用药量的倍数。 计算公式如下： 临床用药量的倍数 （每只小鼠的最大给药量/ 小鼠平均体重）（成人平均体重/ 成人每日用量） ＝ × 【附】 1．小鼠的捉拿和固定操作：捉拿小鼠时应先用右手抓住鼠尾并提起，将鼠放在粗糙的台 面或鼠笼上，在其向前爬行时，用右手向后拉尾，用左手的拇指和示指抓住小鼠的两耳及头 颈部皮肤，将其置于左手的手心中，拉直四肢并用左手的无名指压紧尾部和后肢，右手即可 进行注射和其他操作。取尾静脉血或进行尾静脉注射时，可将小鼠固定在金属或木制的固定 器上。 2 ．小鼠尾静脉注射操作：注射时，将小鼠置于特制的筒内，露出尾部组织，用75% 乙醇 溶液反复擦拭鼠尾，以达到消毒的目的，并且可使尾部血管扩张。选择尾静脉下1/3 处，用细 针头沿血管方向平行刺入尾静脉。如果药液推入阻力较大，注射部位皮下发白，表示针头未 刺入血管内。如推入药液顺利无阻，则表明针头已插入血管，此时，针头固定在鼠尾上，缓 缓将药液推入。 【思考题】 1．最大耐受量是一个相对固定的值吗？ 2 ．最大给药量是不是一个固定的值？ 3 ．最大耐受量与半数致死量的关系如何？ （封　瑞　赵金生） 实验二　溶血性实验 （体外试管法） 【实验目的】 1．掌握溶血性实验的原理。 2 ．了解溶血性实