试验-脑脊液检验教材课程.pptVIP

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脑脊液检验;实验一 脑脊液理学检查;;(注意事项);(操作) 细胞总数计数 直接计数法(适用于清晰透明或微浑脑脊液) 充池:微量吸管吸取混匀的脑脊液,充入血细胞计数板的上下2个计数池。 计数:静置2~3min,低倍镜下计数2个计数池内四角和中央大方格共10个大方格内的细胞数。 计算:10个大方格内的细胞总数即为每微升脑脊液细胞总数,再换算;稀释计数法(适用于浑浊的脑脊液);白细胞计数;稀释计数法(浑浊脑脊液);白细胞分类计数;涂片染色分类法 若直接分类不易区别细胞时,可???脑脊液以1000r/min离心5min,取沉淀物,制成均匀薄片,置于室温或37℃恒温箱内尽快干燥,瑞氏或瑞—吉染色后,油镜下进行分类计数,结果报告与血液白细胞分类计数报告方式相同。若见激活型单核细胞(比普通单核细胞大,胞质边缘趁、呈花边状,胞质内有空泡),转化型淋巴细胞(形态似异型淋巴细胞)及室管膜细胞(形态似大淋巴细胞)应计入分类的百分比中 ;(注意事项);细胞涂片时,为了使细胞容易粘在玻片上,可取沉淀的细胞悬液2滴,加血清1滴,混匀后涂片。 涂片染色分类时,如见内皮细胞或异常细胞,则另行描述报告,必要时用巴氏或HE染色查找肿瘤细胞。 实验结束后,血细胞计数板用0.75%(V/V)乙醇浸泡消毒60min,忌用酚浸泡,以免损坏计数板。 ;方法学评价;血液分析仪也可进行脑脊液细胞计数和白细胞分类,此法简单,快速,但标本尤其是病理性,陈旧性标本中的组织,细胞的碎片以及细胞变形等都可以影响细胞分类和计数,故结果重复性,可靠性有待进一步探讨。另外,蛋白质含量高,尤其有凝块的脑脊液标本容易使仪器堵孔,故不推荐使用;质量控制;白细胞计数直接法的试管或吸管中的冰乙酸要尽量去尽,否则结果偏低。 若标本陈旧,细胞变形时,白细胞直接分类法误差大,推荐用涂片染色分类法分类计数。 涂片染色分类计数时,离心速度不能太快,否则细胞形态受影响,有条件的单位可用玻片离心沉淀法,细胞室沉淀法等收集细胞。 涂片固定时间不能太长,更不能高温固定,以免细胞皱缩。 ;参考值;实验三 脑脊液蛋白质定性检查;(操作) 1.加试剂 取试剂2ml于小试管中。 2.加标本 用尖滴管垂直滴加脑脊液标本1—2滴。 3.观察结果 在黑暗背景下立即用肉眼观察结果。 4.判断结果 (1)清晰透明,不呈现云雾状为(一)。 (2)呈微白雾状,对光不易看见,黑色背景下才能见到为(+—);;注意事项;质量控制;胸腹水检查;化学检查;显微镜检查

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