酶在分析检测中的应用.pptxVIP

5 4 3 2 CONTENTS 分析检测分类 酶在食品分析检测中的应用 酶在环保、能源方面的应用 酶生物传感器 酶分析检测应用概述 1 一、酶分析检测应用概述 用 酶 进 行 物 质 分 析 检 测 的 方 法 统 称 为 酶 法 检 测 或 酶 法 分 析 。 酶 法 检 测 是 以 酶 的 专 一 性 为 基 础 ， 以 酶 作 用 后 物 质 的 变 化 为 依 据 来 进 行 的 。 酶法检测： 检测方法 化 学 检 测 法 光 学 检 测 法 气 体 检 测 法 当 前 迅 速 发 展 并 广 泛 应 用 的 各 种 酶 传 感 器 ， 将 反 应 与 检 测 两 个 步 骤 密 切 结 合 起 来 ， 具 有 快 速 、 方 便 、 灵 敏 、 精 确 的 特 点 ， 在酶 法 检 测 中 发 挥 了 巨 大 的 作 用 ， 且 更 进 一 步 推 动 了 酶 法 检 测 的 发 展 。 酶法检测的种类 单 酶 反 应 多 酶 偶 联 反 应 酶 标 免 疫 反 应 一 二 三 单酶反应监测 多酶偶联反应检测 酶标记免疫反应监测 分析检测分类 单酶反应监测 利 用 单 一 种 酶 与 底 物 反 应 ， 然 后 用 各 种 方 法 测 出 反 应 前 后 物 质 的 变 化 情 况 。 举例 （1）L — 谷氨酸脱羧酶 生成的二氧化碳可以用气体检测法测定。该酶已广泛地用于L 一 谷氨酸的定量分析，可使用游离酶 、 固定化酶或酶电极 举例 （2）葡萄糖氧化酶 该 酶 催 化 葡 萄 糖 与 氧 反 应 生 成 葡 萄 糖 酸 和 双 氧 水 。 可 通 过 测 定 酸 的 生 成 或 氧 的 减 少 来 确 定 葡 萄 糖 的 量 ， 也 可 用 PH 电 极 、 氧 电 极 等 测 出 葡 萄 糖 的 量 。 该 酶 巳 广 泛 用 于 食 品 ， 发 酵 工 业 和 临 床 诊 断 等 方 面 多酶偶联反应检测 举例 （1）萄 糖 氧 化 酶 与 过 氧 化 物 酶 偶 联 使 用 时 先 将 葡 萄 糖 氧 化 酶 、 过 氧 化 物 酶 与 还 原 型 邻 联 甲 苯 胺 一 起 用 明 胶 固 定 在 滤 纸 条 上 制 成 酶 试 纸 。 测 试 时 将 酶 试 纸 与 样 品 溶 液 接 触 ， 在 1 0 一 6 0 S 的 时 间 内 试 纸 即 显 色 。 从 颜 色 的 深 浅 判 定 样 品 液 中 葡 萄 糖 的 含 量 。 其 反 应 过 程 如 下 ： 多酶偶联反应检测 举例 （2）β—半 乳 糖 苷 酶 与 葡 萄 糖 氧 化 酶 偶 联 利 用 这 两 种 酶 的 偶 联 反 应 ， 用 于 检 测 乳 糖 。 首 先 β 一 半 乳 糖 苷 酶 催 化 乳 糖 水 解 生 成 半 乳 糖 和 葡 萄 糖 ， 生 成 的 葡 萄 糖 再 在 葡 萄 糖 氧 化 酶 的 作 用 下 生 成 葡 萄 糖 酸 和 双 氧 水 。 可 以 用 氧 电 极 或 双 氧 水 铂 电 极 等 测 定 葡 萄 糖 的 量 ， 进 而 计 算 出 乳 糖 的 含 量 。 举例 （3）己 糖 激 酶 与 葡 萄 糖 氧 化 酶 偶 联 通 过 这 两 种 酶 的 偶 联 反 应 可 以 用 于 测 定 ATP 的 含 量 。 己 糖 激 酶 （ HK ） 可 以 催 化 葡 萄 糖 与 ATP 反 应 生 成 6 一 磷 酸 葡 萄 糖 ， 反 应 前 后 样 品 中 的 葡 萄 糖 可 通 过 葡 萄 糖 氧 化 酶 (GOD) 催 化 后 用 各 种 适 宜 的 方 法 定 量 测 定 。 葡 萄 糖 的 减 少 量 与 ATP 的 含 量 成 正 比 ， 故 通 过 测 定 葡 萄 糖 量 的 减 少 就 可 以 计 算 ATP 的 含 量。 酶标记免疫反应监测 利 用 单 一 种 酶 与 底 物 反 应 ， 然 后 用 各 种 方 法 测 出 反 应 前 后 物 质 的 变 化 情 况 。 举例 碱性磷酸酶 将 酶 的 检 测 技 术 与 免 疫 检 测 技 术 相 结 合 ， 用 于 测 定 样 品 液 中 抗 体 或 抗 原 含 量 的 技 术 。 简 称 为 酶 标 免 疫 检 测 。 硝基酚磷酸 硝基酚 + 磷酸 酶在食品分析中的应用类型 ELISA技术在食品分析中的应用 近 年 来 ， ELISA 因 其 操 作 程 序 的 规 范 化 、 简 单 化 和 检 测 的 高 灵 敏 性 ， 在 农 药 残 留 、 兽 药 残 留 、 重 要 有 机 物 污 染、 生 物 毒 素、 食 品 添 加 剂 和 人 畜 共 患 疾 病 病 原 体 的 快