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- 2019-10-23 发布于天津
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免疫荧光技术;主要内容; 免疫荧光技术(immunofluorescence)
技术原理
将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看见荧光所在的细胞或组织,利用定量技术测定含量,从而可对抗原进行细胞定性和定位分析。;根据实验方法分类:
直接法
间接法
补体法
其他;补体法:
利用补体反应,通过形成 抗原-抗体-??体复合物发射荧光。;其他免疫荧光技术:
时间分辨免疫荧光分析
荧光偏振免疫分析技术
;时间分辨免疫荧光测定;荧光偏振免疫分析技术; 激光共聚焦扫描显微镜
(Confocal laser scanning microscope,CLSM)
用激光作扫描光源,逐点、逐行、逐面快速扫描成像,扫描的激光与荧光收集共用一个物镜,物镜的焦点即扫描激光的聚焦点,也是瞬时成像的物点。系统经一次调焦,扫描限制在样品的一个平面内。调焦深度不一样时,就可以获得样品不同深度层次的图像,这些图像信息都储于计算机内,通过计算机分析和模拟,就能显示细胞样品的立体结构。
激光共聚焦扫描显微镜既可以用于观察细胞形态,也可以用于细胞内生化成分的定量分析、光密度统计以及细胞形态的测量, 配
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