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项目14 凝血因子检查;模块1 内源性凝血系统的检验;基础理论;血液离体,血细胞下沉。上层析出的黄色清亮液体是血清?
还是血浆?; 血液凝固
定义:血液由流动的液体状态变成不能流动的凝胶状态的过程。
方式:激活凝血系统,使血浆中
纤维蛋白原 纤维蛋白,
形成纤维蛋白网加固血小板血栓(有效止血)。
;血管损伤
暴露血管内皮下胶原
血小板激活
(粘附、聚集、释放)
血小板止血栓
血凝块形成;(一) 凝血因子(blood clotting factor)
定义:血浆与组织中直接参与血液凝
固的物质。
种类:13种(其中F VI是F Va,实为
12种)。
;因子;凝血因子的特点
① 除Ca2+和磷脂外,其余凝血因子均为蛋白质
② 除F III(组织因子)外,其他凝血因子均存在于新鲜血浆中,F Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ在肝脏合成,需维生素K参与。
③ 凝血因子以无活性酶原形式存在血液中,经其他酶水解后暴露或形成活性中心,才有活性,这一过程称凝血因子的激活。激活后,在该因子右下角标上“a”;④ 在凝血中起酶促作用的因子有F Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ、 Ⅺ、Ⅻ、XIII、前激肽释放酶。
⑤ 在凝血中被消耗的因子是Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ 、XIII;最不稳定的是Ⅴ、Ⅷ。 ; a.凝血酶原激活物生成阶段; b.凝血酶原的激活;
c.纤维蛋白的生成; Ⅹ;模块1 内源性凝血系统的检验;内源性凝血途径;;1、静脉采血;2、活化部分凝血活酶时间测定(APTT);;;;;【质量控制】
1.抗凝剂与血液的比例要准确。
2.标本放置不宜超过3h,温育时间不宜少于3min。
3.分离血浆时,离心速度和时间要够,务必除去血小板,特别是用于肝素治疗监测时。
4.若正常对照延长,应重新配制试剂。
5.APTT测定因所用的激活剂不同,以及部分凝血活酶来源及制备的不同,均可影响测定结果。
6.用自动血液凝固仪测定APTT,可提高检测速度和结果精确性,但仪器本身也会产生一定误差, 1995年国际血栓与止血委员会(International Committee of Thrombosis and Haemostasis,ICTH)和ICSH已开始合作研究应用APTT监测肝素治疗时的标准化问题。;【临床意义】
基本与凝血时间意义相同,但敏感性高。目前所用???大多数APTT测定方法,凡当血浆凝血因子低于正常水平的15%~30%即可异常。
1.APTT延长 (超过正常对照10s以上)主要用于发现轻型的血友病。虽可检出因子Ⅷ:C水平低于25%甲型血友病,但对亚临床血友病(因子Ⅷ大于25%)和血友病携带者敏感性欠佳。结果延长也见于因子Ⅸ(血友病乙)、Ⅺ和Ⅻ缺乏症;血中抗凝物如凝血因子抑制物或肝素水平增高时;当凝血酶原、纤维蛋白原及因子Ⅴ、Ⅹ缺乏时也可延长,但敏感性略差;其他尚有肝病、DIC、大量输入库存血等。;2. APTT缩短 见于DIC,血栓前状态及血栓性疾病。
3. 肝素治疗的监护 APTT对血浆肝素的浓度很为敏感,故是目前广泛应用的实验室监护指标。此时,要注意APTT测定结果必须与肝素治疗范围的血浆浓度呈线性关系,否则不宜使用。一般在肝素治疗期间,APTT维持在正常对照的1.5~3.0倍为宜。
;模块2 外源性凝血系统的检验;外源性凝血途径;;1、静脉采血(同前)2、血浆凝血酶原时间(PT)测定;PT测定通常用于以下三种情况:
(1)出血性疾病的病情观察和出血及手术时应补何种凝血因子的检查;
(2)用于检查肝合成维生素K依赖因子(因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ)是否减少,是维生素K缺乏、肝脏病的一项检查指标;
(3)用于缺血性心脏病(如心肌梗塞)和人工瓣膜使用者,在应用双香豆素等口服抗凝剂进行抗凝治疗时的监控项目。;;【操作方法】
1.在试管中加入109mmol/L枸橼酸钠或0.1mol/L草酸钠溶液0.2ml,然后加受检血1.8ml混匀,低速离心,分离血浆。
2.取小试管1支,加入血浆和兔脑粉浸出液各0.1ml,37℃预温,再加入0.1mlCaCl2溶液37℃预温,立即开动秒表,不断倾斜试管,至液体流动停止所需时间,即为凝血酶原时间。重复操作2~3次,取平均值,并作正常对照。;;;【临床意义】
凝血酶原时间延长(超过正常对照3s以上)见于:
1.先天性凝血因子异常,如Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ因子之一或两种以上异常时。但单一凝血因子异常时,其活性要减少到一定水平,PT才延长。如因子I要1000mg/L,Ⅶ5%,Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ要10%。
2.后天性凝血因子异常,如严重肝病、维生素K缺乏(慢性胃肠疾患、阻塞性黄疸)、纤溶亢进、DIC后期、血液中抗凝物质增多及使用抗凝药物,如
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