Alarm-Blue细胞增殖与活性检测试剂.PDFVIP

Alarm-Blue细胞增殖与活性检测试剂 货号 规格 BDXB0003-5 5ml (500次) BDXB0003-10 10ml (1000次) BDXB0003-30 30ml (3000次) 保存：4 ℃避光保存，保质期20个月 产品概述 在细胞增殖过程中，细胞内NADPH/NADP 、FADH/FAD 、FMNH/FMN和NADH/NAD 的比值升高，处于还原环境。摄入细胞内的染料被这些代谢中间体及细胞色素类还原后释放 到细胞外并溶于培养基中，使培养基从无荧光的靛青蓝变成有荧光的粉红色。最后用普通分 光光度计或荧光光度计进行检测，吸光度和荧光强度与活性细胞数成正比。Alarm-Blue检测 试剂为细胞增殖和细胞毒性检测提供了一种简便、快速、可靠、安全的方法，适用于高通量 检测实验。该检测试剂的主要成分是一种氧化还原指示剂。其在氧化状态下呈现靛青蓝无荧 光性，而在还原状态下，转变为呈粉红或红色荧光的还原产物，其吸收峰为530-560nm，发 射峰为590nm。本产品无细胞毒性，不影响细胞代谢、细胞因子分泌、抗体合成等，检测后 的细胞仍然可以进行后续实验。其适用于细菌、酵母类、昆虫类、鱼类、哺乳类等多种细胞， 以及贴壁细胞与非贴壁细胞的检测，可以广泛用于细胞增殖、细胞毒性以及病原微生物的快 速检测与鉴定。 使用方法 1. 在待测样品中加入10%细胞悬液体积的检测试剂，在细胞培养箱内孵育2-6小时，培养 基的颜色由靛青蓝开始变成粉红色就可以进入下一步。 2. 推荐使用荧光酶标仪进行检测，激发光波长在530-560 nm之间，发射光波长为590 nm ， 记录相对荧光单位（RFU ） - 1 -/ 2 3. 绘制标准曲线或细胞生长曲线：纵座标（Y 轴）为相对荧光单位（RFU ）；横坐标（X 轴）为细胞数或时间点或药物浓度。 注意事项 1. 合适密度的细胞可以增加检测灵敏度。对于96孔板，我们建议每孔接种100μl细胞，细 胞浓度范围为：贴壁细胞在100-10,000/孔，悬浮细胞在2,000-50,000/孔，并以培养基为 空白对照。对于384孔板，细胞浓度和接种量均减半。 2. 整个过程均应为无菌操作，因为微生物污染物同样可以还原检测试剂而影响实验结果。 3. 注意接种细胞浓度和加入检测试剂后孵育时间。细胞浓度过高或孵育时间过长，会导致 继发性还原反应，产生无色和荧光消失。 4. 孵育时，须避光。 5. 可以使用荧光或分光光度检测，但荧光的灵敏度高，实验误差小，推荐使用荧光检测。 - 2 -/ 2