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BrdU细胞增殖检测试剂盒（IHC检测）.PDF
BrdU IHC
细胞增殖检测试剂盒 （ 检测）
BrdUcell proliferation Detection Kit(IHC)
说明书修订日期：2018.06.08
Cat number：KGA323
Store at 2-8℃for 6 months
For Research Use Only （科研专用）
一、试剂盒说明
溴脱氧尿苷(5-溴代-2-脱氧尿苷, BrdU) 是一种合成的核苷酸即胸苷的类似物。BrdU通常被用于检测活组织
中再生的细胞。BrdU可以掺合到复制细胞中新的合成DNA 中（在细胞周期S 期），在DNA 复制可代替胸苷。
利用抗BrdU 的特异性抗体便可以用于检测这个插入的化学品，从而检测出细胞是否在复制其DNA。本试剂
盒细胞增殖检测通过检测BrdU 的掺合程度，监测细胞健康程度，估量DNA 合成从而监测细胞分裂。
二、试剂盒组份
Cat:KGA323
组 份 储存条件
50 assays
小鼠抗人BrdUantibody 50ul
即用型HRP标记羊抗鼠IgG 3ml
即用型山羊血清封闭液 3ml
抗体稀释液 5ml 2-8℃
10x 过氧化氢溶液 600ul
浓缩显色液A 150ul
浓缩显色液B 150ul
浓缩显色液C 150ul 2-8℃，避光
备注：本试剂盒所用一级抗体为小鼠抗人、大小鼠及兔抗体，除可以用于人来源的组织样本检测之外，还可
用于大鼠、小鼠及兔来源的样本。
三、试剂盒以外自备仪器和试剂
仪器：
微量移液器、低速离心机、平板摇床、微量移液器、光学显微镜、1.5m LMicro-tube
试剂：
4%多聚甲醛、PBS、二甲苯、乙醇、苏木素染液、BSA、封片胶、Na B O
2 4 7
溶液配置：
1. 0.1M 四硼酸钠(NaB O ), pH8.5
4 7
2. 梯度酒精溶液：50%-70%80%-90%-95%-100%
3. BrdU(5-溴代-脱氧尿苷) （sigma, KGA326）
4. 0.1%TritionX-100：0.05 mlTritionX-100加到9.95 mlddH2O 中
5. 0.5%Tween-20/1%BSA/PBS：0.05 mlTween-20,0.1g BSA 溶于 9.95 ml PBS
6. BrdU在PBS 中储存液 pH7.4 orddH O, 过滤器 (MW 307.1，20 mM 0.006 g/ml)
2
四、操作方法
1、在最适的环境下培养细胞 (细胞密度在临界对数生长期)加入BrdU至终浓度为30μM，孵育30-60 min。
（注意）
2、除去 BrdU用 PBS洗3 次。
3、4% 多聚甲醛室温固定30 min。用 PBS洗3 次。
4、2N HCL，室温反应15 min。
5、0.5%Tween-20/1%BSA/PBS洗3 次，3 min/次。
6、加入与HCL等体积的0.1M NaB O 室温反应15 min，以0.5%Tween-20/1%BSA/PBS完全洗净。
4 3
7、滴加0.1%TritonX-100溶液，冰上处理1
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