免疫细胞分离技术(终).pptVIP

亲和板结合分离法（阳性选择法） （1）将相应抗体结合于塑料平板上 （2）加细胞悬液 （3）各种淋巴细胞亚群具有不同抗原性的特点和表面标志，抗原阳性的细胞与相应的固相抗体结合，吸附在平板上 （3）多次细胞洗涤后我们将得到吸附在平板上的抗原阳性细胞 （4）同理若用特异性抗原交联于塑料板上，则可分离得到具有特异抗原受体的淋巴细胞。但淋巴细胞受体与特异抗原或抗体连接后有可能引起细胞激活，因此，凡欲去除细胞悬液内某一细胞亚群时，即将其用于阴性选择，本法更合适。 * 免疫磁珠法分离细胞原理： ??? 免疫磁珠法分离细胞是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合，在外加磁场中，通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中，无该种表面抗原的细胞由于不能与连接着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性，不在磁场中停留，从而使细胞得以分离。 免疫磁珠法分为阳性分离法和阴性分离法：??? 阳性分离法－磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞??? 阴性分离法－磁珠结合不需要的细胞，游离于磁场的细胞为所需细胞。 荧光激活细胞分离仪(FACS)分离法 主要原理是细胞经荧光染色后，通过高速流动系统，细胞排成单行，逐个流经检测区进行测定。当细胞从流动室喷嘴处流出时，超声振荡搅动液流，使液流断裂成一连串的均匀小滴（40000个/s），每小滴内最多含一个细胞（其中只有百分之几的液滴中含细胞），细胞经激光束