转基因食品与安全性PPT.ppt

分类： 1、半定量PCR法(semi-quantitative PCR)； 2、定量竞争PCR法(quantitative competitive PCR)； 3、实时定量PCR法(real –time quantitative PCR） 特点： 此类方法在实验室阶段基本成熟； 只是要对不同物种、品种的不同性状基因研究具体的条件； 但它对设备及技术要求较高； 费时； 准确性也需进一步确定。 （3） “DNA芯片”技术 方法：通过微加工和生物化学技术，使成千上万的基因集成在lcm2的芯片上，将样品制备、化学反应到检测的整个过程集成化以获得所谓的微型全分析系统(micro total analytical system)。 此方法于80年代提出设想，90年代进行实质性科研．现在进行的商业化生产芯片主要在医学上应用，且品种极少。 特点：可以预见，它在转基因作物上的应用普及将极大地提高分析的自动化和速度，并降低成本和污染等。 检测趋势1： 随着转基因食品商品化进程加速，越来越多的目的基因将被转入种类更加繁多的食品作物中，使用的启动子、终止子也将不再局限于目前的几种。 因此，常规PCR检测将可能造成越来越多的假阴性，能同时检测多个启动子、终止子、目的基因、内参照基因的基因芯片将成为必需。 检测趋势2： 建立快速可靠的GMF检测手段，也成为卫生监管部门面临的刻不容缓、必须解决的问题 The End! * * 转基因食品不能证明与对应的参照食品实质等同时，要做进一步的毒理学试验，试验主要包括： (1)毒物动力学试验，了解它的吸收、分布、代谢及排泄等情况 (2)遗传毒性试验，包括体外试验和体内致突变试验 (3)潜在致敏性试验 (4)基因传递与稳定性试验。检查是否导入的基因向人畜胃肠道中存在的微生物中转移和表达 (5)微生物定植和微生物致病性试验。对本身是活菌或含有活菌的新型食品要评价这两项指标 (6)啮齿类90天喂养试验。其中注意遗传毒性、神经毒性、免疫毒性及生殖毒性 (7)验证对人类的安全性；一定时期后，对转基因食品安全性的再评价。包括耐受量、肠道群菌谱及数量等。 Safety assessment of the marker gene标记基因的安全性评价 标记基因的用处？ 转基因作物在实验室阶段经常要用抗生素作为抗性标记进行筛选； 选择标记基因用于植物遗传转化中促进转化细胞、组织和转基因植株的生长。 The normal marker gene:常见标记基因:(1)marker gene for kanamycin resistance 抗卡那霉素基因(2)marker gene for new hygromycin resistance 抗新潮霉素基因(3)抗草甘膦基因(4)GUS报告基因 公众为什么关心标记基因的安全性？ 尽管国际社会认为大部分常用的标记基因是安全的，但仍有一部分标记基因的安全性未能确定； 所谓的安全使用的标记基因，仅指基因本身，并不包括启动子、终止子、基因多效性及其它多种可能的次生效应，次生效应可因插入位点不同而异，目前人类无法预测基因插入位点和准确地做到基因的定位整合。 标记基因涉及的安全性问题： 标记基因及其编码蛋白的直接毒性； 蛋白代谢产物的毒理学安全性； 蛋白质的过敏性和基因水平转移的可能性 标记基因的评价内容 1、Whether the labeled gene is toxic to human directly 标记基因有无直接毒性 任何DNA都由4种碱基组成 DNA在小肠中仅有200mg 标记基因DNA在结肠中仅有0.3-1pg，在消化道中是微不足道的 DNA在消化道中很快被降解 WHO、FDA实验证明食物中的转基因DNA本身无安全性问题 2、The possibility of transferring horizontally 基因水平转移的可能性 DNA被降解成小片段或核苷酸，在进入肠道微生物存在的小肠下段，盲肠及结肠前已被降解。 即使DNA完整存在，DNA转移并整合需要有感受态的细胞，其过程非常复杂，同时小肠上皮细胞新陈代谢，半衰期很短，不断被取代，不可能保存下来。 ３．The unpredicted poly-effect of gene 未预料基因多效性 常规育种中筛除不利性状 进行实质等同性鉴定 4．The safety of labeled gene coding protein include the direct toxicity, allergenicity and co-effect 标记基因编码蛋白的安全性包括直接毒性、过敏性、因蛋白的催化