《细胞生物学》实验教学大纲.docVIP

PAGE PAGE 1 《细胞生物学》实验教学大纲 课程名称：细胞生物学 英文名称：Cell biology 课程性质：专业课程 不独立开课 适用专业：生物科学，本科 考核方式：认真批改平时实验作业，按5分制记分，期末进行统计，结合平时考核、提问情况，计算出实验成绩，占总成绩20％。 课程简介：该课程为生物科学专业本科生必修课程，细胞生物学实验是教学过程中的重要环节，其目的是使学生通过实验掌握细胞生物学实验的基本原理、基本方法与技术，巩固和加深对课堂理论知识的理解。培养学生独立进行科学研究的基本技能，提高学生的动手能力及分析问题、解决问题的能力，养成严谨的科学态度，为以后的工作打下坚实的研究基础。 实验教材及参考书： 教材采用《细胞生物学实验与习题指导》（第二版）鲍明升主编，中国科技大学出版社，2015年4月 参考书： 《细胞生物学实验教程》（第一版）安利国主编，科学出版社，2004； 《细胞生物学实验指导》（第一版），李素文主编，施普林格出版社，2001； 《细胞生物学实验教程》（第一版）王金发等主编，科学出版社，2004； 《细胞生物学与医学遗传学实验指南》（第一版），蔡绍京主编，第二军医大学出版社，2002。 实验一 显微镜的使用及细胞形态的观察 一、类别： 综合性实验。 二、实验目的和要求： 通过实验要求学生掌握低倍镜及高倍镜的使用方法；熟悉光镜下动、植物细胞的基本形态并掌握和显微绘图方法。 三、实验内容： 【实验原理】 光学显微镜，简称显微镜或光镜，是利用光线照明使微小物体形成放大影像的仪器。显微镜的成像原理（放大原理）。 光线→反光镜→遮光器→通光孔→标本（一定要透明）→物镜的透镜（第一次放大成倒立实像）→镜筒→目镜（再放大成虚像）→眼。 物镜的作用：使被观察物体成一个倒立的放大的实像。像投影仪的镜头。 目镜的作用：把物镜成的实像，再一次放大成虚像。像放大镜的镜头，把物体的像放大。 【器材与试剂】 血涂片、洋葱表皮细胞切片、擦镜纸、二甲苯、香柏油。 【内容】 1、光学显微镜的基本结构与功能； 2、光学显微镜的使用方法：低倍镜、高倍镜和油镜的使用； 3、操作练习； 4、血涂片和洋葱表皮细胞切片的观察； 5、显微绘图的基本要求。 【思考题】 1、显微镜的构造分哪几部分？各部分有什么作用？ 2、反复练习使用低倍镜及高倍接物镜观察切片，使用时应特别注意什么问题？ 3、如何判断视野中所见到的污点的来源？目镜在显微镜的成像上起什么作用？ 四、学时： 3学时。 五、主要仪器设备： 显微镜。 六、实验中注意事项： 1、显微镜各部零件不要随便拆开。也不要随意在显微镜之间调换镜头或其它附件。 2、接目镜与接物境透镜部分不要用手指或粗布揩擦，要用清洁柔软的薄绸布或擦镜纸轻轻擦拭。镜头上如沾有树胶或油类物质，可先用擦镜纸蘸上少许二甲苯捺拭干净，再换用干净的擦镜纸擦拭一遍。 3、在使用高倍镜和油镜时注意对物镜的保护。 实验二 特种显微镜（荧光显微镜、相差显微镜）的使用 类别： 验证实验。 实验目的和要求： 掌握荧光显微镜与相差显微镜的使用方法 熟悉荧光显微镜与相差显微镜的基本原理和基本结构；。 了解荧光显微镜与相差显微镜的应用范围。 三、实验内容： 1、介绍荧光显微镜和相差显微镜的结构、原理及其在细胞生物学中的应用； 2、相差显微镜的使用； 3、荧光显微镜的使用。 四、学时： 4学时。 五、主要仪器设备：荧光显微镜与相差显微镜 六、实验中注意事项： 1、荧光显微镜在使用之前开光源达15分钟；并检查接目镜上是否有滤色片； 2、相差显微镜在使用之前要合轴调整。 实验三 细胞活体染色和细胞器观察 一、类别： 综合性实验。 二、实验目的和要求： 通过实验要求学生掌握细胞超活染色方法和染色原理以及临时制片技术。 三、实验内容： 【实验原理】 超活染色法是从活的生物体分离部分组织细胞，使它保持生活状态，用活体染色剂进行染色的一种方法。 线粒体是细胞内一种重要细胞器，是细胞进行呼吸作用的场所。细胞的各项活动所需要的能量，主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿 B是线垃体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态。 【主要内容】 1、线粒体的超活染色与观察； 2、小鼠肾脏切片线粒体的观察； 3、人口腔黏膜上皮细胞制片与观察。 四、学时： 3学时。 五、主要仪器设备与试剂： 显微镜、小鼠肾脏切片、中性红－詹纳斯绿 B染液、0.5％次甲蓝、牙签、载玻片、盖玻片、吸水纸、擦镜纸、纱布、滴管。 六、实验中注意事项： 1、在做线粒体超活染色实验时，取材时