国产雨生红球藻藻粉质量安全性评价.docVIP

国产雨生红球藻藻粉质量安全性评价 《饲斟工业》?2007年囊28■囊2期 画画蜜鹤鼹凰凰渤癌鸯蜜篷鼢 张晓丽刘建国林伟刘伟史朋家王增福崔效杰薛彦斌 虾青素(Astaxanthin)是类胡萝卜索的含氧衍生 物,能够有效地淬灭活性氧,具有较高的营养和药用 价值.许多学者通过动物和临床试验证明,虾青素能 够越过动物血一脑屏障田,有抑制肿瘤发生圆,增强免疫, 预防心血管疾病【5J等多方面的生理功能.具有广阔的 应用前景.目前,虾青素在国际上主要作为新型高效 饲料添加剂应用于水产养殖业,已广泛应用于鲑鱼, 鳟鱼,对虾等的养殖中,且已被美国,加拿大,日本及 欧盟等国的食品监察机构确定为安全,高效的动物 饲料. 雨生红球藻是自然界中虾青素含量最丰富的生 物,其虾青素含量可达干重的3.0%,甚至更高,被誉 为天然虾青素的浓缩品.天然虾青素具有极强的抗 氧化,维护动物机体健康及增色作用.作为饲料添加 剂和生物保健品,虾青素在国际市场上的需求量很 大.因此,雨生红球藻是继螺旋藻,盐藻之后的另一种 经济微藻.. 雨生红球藻藻粉在美国已经获得了FDA的批准, 允许作为新的膳食成分进入保健品市场:日本也被批 准将其应用于食品和饲料行业;欧共体也已有产品注 册.我国雨生红球藻的研究主要停留在实验室阶段,规 模化生产还没有进行.产品质量可能会受红球藻藻种, 生产方式,收获和加工工艺等的影响而产生很大差异, 因此,必需对国产雨生红球藻藻粉进行质量安全性评 价.本文以中国雨生红球藻藻株和国内工艺技术流程 生产的藻粉为原料,通过微生物学检验,重金属含量测 定以及急性毒性试验,进行了质量安全性评价,以期为 推动雨生红球藻产业化发展提供科学依据. 1材料与方法 张晓丽,中国科学院微生物研究所,助理研究员,100080, 北京市海淀区中关村北一条l3号. 刘建国(通讯作者),林伟,刘伟,史朋家,王增福,中国科学 院海洋研究所. 崔效杰,薛彦斌,潍坊科技职业学院. 收稿日期:20o6一l0—04 ★国家农业成果转化基金(02EFN2l66ol2l3),青岛市科技 计划项目(02—1RCHHH一57)和中国科学院海洋研究所创 新项目(资助 1.1试验材料 雨生红球藻藻株由本实验室提供.无菌保存在培 养室中.藻粉生产在中国科学院海洋研究所微藻生物 技术中心的生产车间进行.采用逐级放大培养和二步 生产技术.第一步培养的目的是获得高生物量,由3 级逐步放大完成.一级培养在实验室中进行,按照无 菌要求操作;二级培养在光温控制的生产车间进行, 采用柱状光生物反应器通气培养;三级培养在密闭的 平行管道式光生物反应器中进行,并连续不断地搅动 和补充二氧化碳.第二步培养的目的是获得高虾青素 含量的藻粉,采用生物幕技术完成.藻体收获采用物 理沉降和过滤技术,藻泥呈团状,冷冻贮藏,然后经真 空冷冻干燥(FreezeDryer18,LABCONCOCorporation) 加工为红褐色粉末,经测定,藻粉中的虾青素含量≥ 1.0%.试验前,藻粉用超高速气体细胞破壁机处理 (CBF一250型底部沸腾流化床气流粉碎机,四川绵阳), 以提高藻粉中虾青素的生物利用率. 1.2试验方法 1.2.1卫生微生物学检验 无菌称取25g样品,均质,加225ml无菌生理盐 水,混匀备用.按照《国家食品卫生微生物学检验标 准》进行菌落总数,大肠菌,霉菌,酵母菌以及致病菌 (包括沙门氏菌,志贺氏菌和金黄色葡萄球菌)的检测. 1.2.2重金属含量测定 精确称取雨生红球藻藻粉0.5g,加入HNO3(超 纯)和HC104(分析纯)共20lnl,比例为1:5(体积比), 加热溶解至液体透明,加入体积比为1:1的HNO3 (超纯)和H2o(超纯)2lnl提取,定容至25lnl,以备测 定.铅,镉含量用原子分光光度计法(原子分光光度 计,PE-4100ZL,珀金一埃尔默公司,美国)测定;砷,汞, 硒含量用荧光光谱法(原子荧光光谱仪AF_610A,北 京瑞利公司,中国)测定. 1.2_3小鼠急性毒性试验 按照GB15193.3—20o3《食品安全性毒理学评价程 序和方法》进行小鼠急性毒性试验.昆明种小白鼠二 级.由青岛市动物中心提供.试验在青岛市疾病控制 中心动物实验室进行,实验室温度范围为22～24℃, 相对湿度为55%一60%.饲养方式为笼养. 试验前取藻粉5.0g,加蒸馏水至20lnl,混匀以 张晓丽等:国产雨生红球藻藻粉质量安全性评价 备灌胃用.试验采用一次最大限度法.试验前先观察 动物3d,选其中健康成年小鼠40只,雌雄各半,每只 体重19.0—21.0g.试验分为4组,每组10只.试验组 剂量设计为每千克体重10.0g,按每10g体重0.2IIll 的备用液4h内分两次经口灌胃;对照组用同体积的 生