第6节分离度及影响因素.pptVIP

第二章 色谱法的基本术语及理论 主要内容 主要内容 一、分离度的定义 一、分离度的定义 分离度由下式计算： 《中华人民共和国药典》要求“除另有规定，分离度应大于1.5”。 在实际工作中，有时R = 1.25 时也被认可，因为GC与HPLC的误差为1％。 二、影响分离度的因素 分离度不仅取决于两组分的保留时间，也取决于其对应色谱峰的宽度。相同的分离度在高效或低效色谱系统中均可达到，因为影响分离度R大小的因素可以用下式表示： n 为色谱柱的理论塔板数； α为相对保留值比（即分配系数比或容量因子比），即α = k2 / k1，k1、k2 分别为两待分离组分的容量因子；α﹥1，即 k2 ﹥k1； k 为相邻两组分中保留时间长的组分的容量因子，即 k2。 k 变小，谱带流出较早，分离度变差；k变大，分离度增加。但是当 k = 5～6 时，对分离度的贡献已基本上达到最大，再增加对分离度已无多大贡献。 在填充柱气相色谱中，柱效低，因而为了达到预期的分离度，选择性是最重要的因素，因此，在填充柱气相色谱中，需提供许多种性质不同的固定相供选择。 在高效毛细管气相色谱中，只需使用几种固定相就可分离复杂的混合物。 三、改善分离的一般原则 三、改善分离的一般原则 （1）增加色谱柱长 对于长度不同的同一种色谱柱： （2）增加固定相的量 增加固定相的量，则 k 增加，柱容量项增加，分离度增加