第三章常压柱分离技术.pptVIP

第三章 常压柱分离技术 一．柱色谱分离技术分类 二．层析柱的制备 三．样品的制备与上样 四．洗脱与分离 五．注意问题 一．柱色谱分离技术分类 柱色谱分离与薄层色谱类似，是靠洗脱剂把分离的各组分逐个洗脱下来的过程，故也称洗脱色谱。 由于色谱柱填充的吸附剂的量远远大于薄层板，因而柱色谱可用于分离量比较大（克数量级）的物质，而薄层制备色谱分离量比较小，一般在毫克数量级。所以作为较大量制备分离，柱色谱优于薄层色谱。 在柱色谱分离过程中,一般利用薄层色谱摸索柱色谱的分离条件; 利用薄层色谱鉴定、分析和分段收集洗脱出的洗脱液中的成分。 柱色谱分离技术按色谱原理 可分为下列类型： —吸附柱色谱 —分配色谱， —离子交换色谱， —分子排阻色谱 —亲和柱色谱，等。 柱色谱分离原理 利用欲分离的混合物中各组分分配在吸附剂和洗脱剂之间，被吸附、分配、交换的性质不同，而相互得以分离。 化合物被吸附、分配、交换的这种作用越强，该化合物溶解在洗脱剂中越少，沿洗脱剂移动的距离则越小。反之，越多。 实验室常用的柱色谱有： —以硅胶和氧化铝为吸附剂的吸附柱色谱； —以硅胶、纤维素和聚酰胺为载体（支持剂），以其吸收较大量的液体作为固定相的分配色谱（这里支持剂本身不起分离作用）。 —以葡聚糖凝胶为固定相的分子排阻柱色谱； —以离子交换树脂为固定相的离