《重楼属植物遗传多样性的RSAP标记》【毕业设计论文】.docVIP

PAGE 精品 重楼属植物遗传多样性的RSAP标记 植物科学与技术 摘要： 研究重楼属植物DNA指纹图谱，初步探讨RSAP分子标记技术在重楼属植物遗传多样性研究上的应用。采用限制性位点扩增多态性(restriction site amplification polymorphism，RSAP)技术对重楼属8个种进行基因组DNA多态性分析。用10条RSAP引物即选出18对引物组合构建了8个种的DNA指纹图谱。通过遗传距离构建系统进化树，重楼属8个种的进化关系得到了很好的分辨。RSAP标记能够对重楼属植物进行准确的分子鉴定,为重楼属中药材的种类鉴定和种间的分类地位提供分子生物学依据。 关键字：重楼，RSAP，PAGE，聚类分析 Genetic Diversity Analysis of Paris by RSAP Makers LI Yi-wu Plant Science and Technology Grade 2007 Directed by TIAN MENG LIANG Associate Professor Abstract : Studies on DNA fingerprinting of 8 paris and application of restriction site amplification polymorphism(RSAP) to the identification of Paris. Sequence—related amplified polymorphism(SRAP)molecular markers were used to detect the genetic diversity of 7 accessions of Paris collected from TianQuan and BaoXing in Sichuan，and one from LiJiang in YunNan. The DNA fingerprinting of 8 species were generated by 18 primer combination screened from 45 primer combinations.8 accessions were clustered into 4 groups by genetic distance. Based on molecular biology methods of RSAP analysis,accurate molecular identification could be performed on traditional Chinese medicinal material plants in Paris,and provided molecular evidence for taxonomy and identification of different species in Paris. Key words ：Paris，RSAP，PAGE，clustering 重楼属（Paris）植物为多年生草木，隶属于延龄草科（Trillaceae），全世界重楼属共24个种，分布在远东地区的热带及温带地区，我国有19种，以西南各省区居多。重楼根茎匍匐状，茎单生，直立。叶4至多枚轮生，极少3，具叶柄，披针形到卵形，基部具3条主脉，为网状脉。花单生于叶轮之上，花被和雄蕊4数或更多，又名灯台七、王孙、蚤休、七叶一枝花等[1]，含蚤休甙、蚤休士宁甙、生物碱、氨基酸等。对流感病毒有较强的抑制作用，对痢疾杆菌、副伤寒杆菌、沙门氏菌、副大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、脑膜炎双球菌等有抑制作用。具有清热解毒，消肿止痛，凉肝定惊的功效，用于疔疮痈肿，咽喉肿痛，蛇虫咬伤，跌扑伤痛，惊风抽搐[2]。该属植物分类学地位至今未有定论，不同种之间有的外部特征较相似，形态有重叠或交叉，容易混淆[3]。近年来, 近年来被广泛用于许多中成药和新药的制作。 随着药物工厂化生产的发展,重楼被乱采滥掘,再加之不注意其保护和繁育,重楼自然资源面临着逐渐枯竭的危险。因此,无论是从药用植物种质资源的保存,还是从重楼植物资源的可持续利用来说,都需对重楼的遗传多样性作更深一步的探讨。商品重楼需求量增大, 野生资源急剧减少, 商品药材基原混乱, 药材品质不一, 寻找鉴定重楼药材的有效方法迫在眉睫[4]。 相关序列扩增多态性( sequence-related amplified polymorphism，SRAP) 是由美国加州大学蔬菜作物系Li与Quiros【5】博士于2001年提出的。RSAP (