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◎4D一斗／ 釜笪．出血 ． 《淡水渔业》20OO年第 30卷第4期 草鱼出血病病毒高滴度培养方法的研究 S9牟3。112 (华中理工大学生审科学与技术学院，武昌 430074 sq￡}I．4ll 中国水产科学研究院长江水产研究所 。荆州434000) 本文对草鱼出血病病毒 854抹高滴价培养的几 片刻后。倾去消化液，然后接种病毒 ，方法同 1。 种方法进行了的研究．现将结果报告如下 ： 3．4 在对细咆进行传代培养的过程 中，将 854株病 材料和方法 毒加人细胞悬液 中，同时分瓶培养，即让细胞和病 1 细胞 ：草鱼 肾脏组织细胞系 (taX) (左文功 ， 毒共 同培养，观察 细胞病变情况 ．测定病毒 的 1986)，培养基为含 10％小牛血清的CAS。 TCID／nd。 2 病毒：草鱼出血病病毒854抹，维持液为2％小 结 果 牛血清的CAS。 1 细胞病变过程 3 高滴价培养方法 病毒感染细胞后 ．上述四种方法处理的细胞其 3．I 用854抹病毒接种刚生长成单层的CIK细胞 病变过程基本相同，开始是细胞单层出现少许边缘 系 (区别于致密单层细胞 。下 同)。病毒接种量为 不整齐的空洞，接着是空洞数量增加 ，空洞面积增 维持液量的 1／10．28℃吸附60分钟后．添加维持 大，细胞逐渐崩解 、脱落，最后细胞单层呈现破鱼 液 ，28℃培养，观察细胞病变过程 ．测定病毒 的 网状，病变细胞达 90％以上。病变持续时间除细 TCII~o／mlo 胞和病毒共培养处理方法约需 10天左右外 ．前三 3．2 精氨酸处理 在接种病毒时．向病毒液中加 种方法处理的细胞其病变过程在45天完成。 入浓度0．1％精氨酸溶液。28℃吸附60分钟，添加 2 病毒滴度测定结果 维持液．28℃培养，观察细胞病变过程。测定病毒 采用微量细咆培养滴定系统测定四种方法处理 的TCI~ ／ml。 后所培养的病毒滴度．(ICII~o／nd)。结果见表 1。 3．3 用 合单层细胞 裹 1 革量出血■■毒寓漓度培养方法与结果 处理方法 汇合单层细胞 精氨酸处理 胰酶处理 细胞病毒共培养 病毒滴度 (1 ) l05 ±00(4】 1 扎 “) l0I 105 ±0 ( 检验 比较显著 不显著 不显著 讨 论 量与场所．而且只能在易感的话细胞中才能繁殖。 病毒是不具细胞结构的生物大分子 ．它缺乏完 病毒的增殖不是以二分裂的方式进行繁殖 ．而是以 整的酶系绕．不能单独进行物质代谢，它必须在细 一 种复制 (印1ic瞰im)方式进行增殖。病毒的繁殖 胞中寄生．由宿主细胞提供病毒合成的原材料、能 过程有明显的阶段特征，它的繁殖过程可以分为吸 收稿 日期：2O0D__o2—21 40 附、进人 、脱壳 、复制与合成、装配与释放几个