锯缘青蟹精子顶体反应的研究3.pdf

动物学报 　47 (3) : 310～316 , 2001 A cta Zoologica S inica 　　　　　 　 锯缘青蟹精子顶体反应的研究 ① ② ① ③ 王艺磊 　张子平 　谢芳靖 　李少菁 ( ①集美大学水产生物技术研究所 , 福建厦门 361021) ( ②香港城市大学生物与化学系 , 香港九龙) ( ③厦门大学海洋学系 , 福建厦门 361005) 摘　要 　采用正交实验法研究了诱导锯缘青蟹精子产生顶体反应的最佳条件。结果表明 : 从纳精囊中获得的精 ( μ ) 子 , 用离子载体A23187 64 g/ ml 诱导 , 在 CaCl2 浓度为 0 25 % , p H 为 90 的人工海水中40 分钟 , 可以得到 最大的顶体反应率 (825 %) 。在此基础上采用光镜和电镜观察顶体反应过程中显微和超微结构的变化。顶体反 应过程可大致分为两个时相。第一时相为顶体囊外翻 ; 第二时相为顶体管前伸。本文还对顶体反应的作用进行 了初步探讨。 关键词 　锯缘青蟹 　精子 　顶体反应 　显微结构 　超微结构 　　锯缘青蟹 ( Scylla serrata) 属甲壳动物十足目 (LeungTrujillo et al . , 1987) , 用玻璃匀浆器研磨 , 爬行亚目短尾派方额亚派梭子蟹科。十足目精子无 然后用双层筛绢网过滤 , 在离心机上以 440 r/ min ( ) 鞭毛、不运动 , 因此其精子的顶体反应和常规鞭毛 离心 3～5 分钟后 , 取乳白色沉淀置于冰箱 4 ℃ 型精子的顶体反应有很大的差异 , 而且也复杂得 中备用。每次实验都解剖 5 只以上的锯缘青蟹。 多。堵南山等 ( 1987 , 1993) 曾用卵水等诱导研究 离子载体 A23187 用二甲亚砜溶解 , 配成 2 ( ) ( ) 了中华绒螯蟹 Eriochei r sinensis 的精子顶体反 mg/ ml 的母液 , 置冰箱 4 ℃ 中备用。根据顶体 应。国外对十足目精子的研究 , 在游泳亚目以 反应的需要 , 用微量移液管移取不同的量。 Clark 等 ( 1981 , 1984 , 1988) 的工作最具代表性 , 先用过滤海水测定锯缘青蟹顶体反应的最佳时 他们对锐脊单肢虾 ( S icyonia ingentis ) 的精子顶 间。把精子团用过滤海水稀释至 4 ml , 在 7 个 ep 体反应进行了十几年深入的研究 ; 在爬行亚目最近 pendorf 管中各加入 05 ml , 再加入 2 mg/ ml 的 ( ) A23187 母液 125 μ ppendorf 管中 A23187 的 主要有 Medina 等 1992a , 1992b 对唐氏招潮蟹 l , 使 e ( ) μ ( Uca tangeri) 和 Talbot 等 1980 对美洲龙虾 浓度为 50 g/ ml , 分别在 1