第五章第二节pH对发酵的影响及讲课教案.pptVIP

第五章发酵工艺过程控制第三节 pH对发酵的影响 及其控制一、pH值对发酵的影响二，发酵过程中pH的变化三、发酵pH值的确定和控制;发酵过程的pH 值;一、pH值对发酵的影响;如：pH对海藻糖水解酶产生的影响;漆酶(Laccases) 在漆树的永延液汁中可被此酶氧化变成黑色色素的物质是漆酚、氢化漆酚等。 借助氧将对苯二酚（氢醌）氧化成对苯醌的酚氧化酶的一种，亦称为对苯二酚氧化酶。 是一种结合多个铜离子的蛋白质，蓝色，分子量约12万，含4原子铜。属于铜蓝氧化酶，存在菇、菌及植物中。 漆酶可存活于空气中，发生反应后唯一的产物就是水，因此本质上是一种环保型酵素。由于这几年环保意识逐渐被人所重视，因此近年来漆酶也成为众多学者的研究对象。;pH影响菌体的生长;①pH值影响酶的活性;培养基与胞内pH;②pH影响微生物细胞膜所带电荷的状态;不同pH值对菌体的形态影响很大： 当pH值高于7．5时：菌体易于老化，呈现球状； 当pH值低于6．5时：菌体同样受抑制，易于老化。 而在7．2左右时：菌体是处于产酸期，呈现长的椭圆形； 在6．9左右时：菌体处于生长期，呈“八”字形状并占有绝对的优势。;③pH影响培养基某些组分和中间代谢产物的离解： 从而影响微生物对这些物质的利用。 ; ④pH不同，往往引起菌体代谢过程的不同，使代谢产物的质量和比例发生改变 例 ：黑曲霉在pH2~3时发酵产生柠檬酸，在pH近中性时，则产生草酸。 又如：谷氨酸发酵，在中性和微碱性条件下积累谷氨酸，在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺 由于PH值的高低对菌体生长和产物合成产生明显的影响，所以在工业发酵中，维持最适PH值已成为生产成败的关键因素之一。 ;（一）、发酵过程pH变化的原因 　培养基中营养物质的代谢，是引起pH值变化的主要原因 1、基质代谢 （1）糖代谢 特别是快速利用的糖，分解成小分子酸、醇， 使pH下降。 糖缺乏，pH上升，是补料的标志之一。 （2）氮代谢 当氨基酸中的-NH2被利用后pH会下降； 尿素被分解成NH3，pH上升， NH3??用后pH下降， 当碳源不足时氮源当碳源利用pH上升。 ;生理碱性物质、生理酸性物质;生理碱性物质、生理酸性物质; 2.培养基 引起pH值下降的因素 碳源过量 消泡油添加过量 生理酸性物质的存在 引起pH值上升的因素 氮源过多 生理碱性物质的存在 中间补料，碱性物质添加过多;如： 培养基对林可霉素发酵的影响 ;pH;3、产物形成 ;;菌体有一定的自调pH值能力;pH在微生物培养的不同阶段有不同的影响 ;在不同的发酵阶段所要求的pH值不同;最适pH值的确定;最适pH值确定的条件;2、pH的控制; (b) Qp的最适pH值范围很窄，而μ的范围较宽；或反之。 (c) μ和Qp对pH值都很敏感，它们的最适pH值又是相同的。 第三种情况的发酵pH值应严格控制； (d)第四种情况更复杂，μ和Qp有各自的最适pH值，应分别严格控制各自的最适pH值，才能优化发酵过程。;B .控制方法;在发酵过程中根据糖、氮消耗需要进行补料。在补料与调pH没有矛盾时采用补料调pH 如 ①调节补糖速率；消泡剂(如豆油)的个别情况下， 还可采用提高空气流量来加速脂肪酸的代谢，来 调节pH ②当NH2-N低，pH低时补氨水； 当NH2-N低，pH高时补(NH4)2SO4 ③ 当补料与调pH发生矛盾时，加酸 碱调pH ; 分别在4种缓冲介质中，于pH 6．50一9．50测定天冬酰胺酶酶活力． 1 甘氨酸介质pH 8.00时酶活力最高； 2 硼酸在pH 8．50，酶反应最快 3 磷酸在pH 8．50，酶反应最快 4 Tris（三羟甲基氨基甲烷）在pH 8．50，酶反应最快 酶活1＞2＞4＞3;不同pH控制方式对目的突变株ISw330异亮氨酸摇瓶发酵的影响，结果如图所示。 “1”表示只加CaC03控制pH值， “2”表示只加尿素控制， “3”表示CaC03和尿素联合控制pH值。;例：pH对L-异亮氨酸发酵的影响（天津科技大学）;;pH6．9时：菌体生长旺盛， pH7．15时：对菌体的产酸有利。 因此，采用阶段pH控制模式进行发酵： 发酵中前期：控制pH6.9， 到48h后： pH值为7.15， 到80h后： pH值为7.25。 产率22．27g·/L，产酸率提高12．23％。;例：克拉维酸发酵中pH变换控制;研究不同pH对克拉维酸Clavulan