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第二章生物化学检验中的诊断酶学 广州医学院 刘忠民 KEY POINTS 1.List the factors that affect enzyme level in blood. 2.State the methods of enzyme activity measurement, and its effect factors. 3.State the physiological actions, tissue distribution, clinical signification, and methods of analysis of ALT,AST,GGT,LD,ALP,ACP,CK,AMS,LPS and CHE,etc. 4.List the isoenzymes methods of analysis, and discuss the migration of CK. 5.List five additional important enzymes and state their clinical signification. Major Objectives 掌握血浆酶病理性变化的机制;酶活性浓度测定的基本原理;酶活性浓度的测定方法;底物或产物浓度的检测;酶偶联反应法;工具酶与共通反应途径;标本及标本采集和处理因素、试剂及方法学因素、仪器因素的影响及控制;最适测定条件与条件的优化;体液酶测定在临床诊断中的作用。 Major Objectives 熟悉正常血浆中酶的动态,影响正常血浆酶活性的自身因素和生物学因素;酶活性浓度的单位;体液中常见酶及同工酶的生物化学检验的测定方法、临床意义;酶学检测的应用;同工酶及其亚型检测的临床意义。 了解血浆中的巨酶及其他体液中的酶;酶质量浓度的测定方法和优缺点;同工酶及其亚型测定的常用方法。 Brief Contents 第一节 组织和体液中的酶 第二节 生物化学检验中酶的测定 第三节 体液中常见酶及同工酶的生物化学检验 第四节 酶学检测在临床上的应用 第一节组织和体液中的酶 本节内容 一、正常血浆中的酶 (一)正常血浆中酶的动态 (二)影响正常血浆酶活性的自身因素 (三)影响正常血浆酶的生物学因素 二、血浆酶的病理性变化 (一)酶合成异常 (二)酶释放增加 (三)酶排出异常 三、血浆中的巨酶 四、其他体液中的酶 一、正常血浆中的酶 (一)正常血浆中酶的动态 (二)影响正常血浆酶活性的自身因素 (三)影响正常血浆酶的生物学因素 1.正常血浆酶的来源 根据酶的来源及其在血浆中发挥催化功能的情况,可将血浆酶分成血浆特异酶和非血浆特异酶两大类。 (1)血浆特异酶: 此类酶属血浆蛋白的固有成分,在血浆中发挥特定的催化作用,是血浆固有的酶。如凝血酶原、纤溶酶原等,它们属于蛋白酶的凝血与抗凝血因子。它们大多数在肝脏合成,以酶原形式分泌入血,在一定条件下被激活,引起相应的生理或病理变化。当肝功能减退时,可见血浆中这些酶活性降低。 (2)非血浆特异酶: 这类酶在血浆中浓度很低,并且在血浆中很少发挥催化作用。可进一步再分为: ①外分泌酶,此类酶指来源于消化腺或其他外分泌腺的酶。如胰淀粉酶等。它们在血液中含量与相应的分泌腺的功能及疾病有关。 ②细胞内酶,此类酶指存在于各组织细胞中,参与物质代谢的酶类。这类酶大部分无器官专一性,称非器官特异性酶;只有小部分来源于特定的组织,有器官专一性,称器官特异性酶。这类酶细胞内外浓度差异悬殊,病理情况下极易升高。红细胞、血小板、肌肉、心、肝、肾和中枢神经系统等是正常血浆中各种酶的重要来源。 ③其他酶,凡不属于上述范围的酶,如骨型ALP等。 2.正常血浆酶的去路 一般认为,血液中酶的清除方式与其他血浆蛋白质类似,但是具体清除途径尚不十分明了。 血浆酶主要是在血管内失活或分解。 尿液则是小分子酶排出的途径。相对分子量<7~8万的血浆酶,如胃蛋白酶原(相对分子量4.5万)可以从肾小球滤过并排出,但相对分子量较大的LD(13.5万)、ALP(8.9万)等则不能从肾小球滤过并排出。 由于血浆酶消失速率因人不同,因酶而异,故在诊断学中尤应注意各种酶的变化时间特点,以免误诊。 1.细胞内外酶浓度的差异 细胞膜内外的酶浓度差是驱使酶向外释出的动力。酶浓度差愈大,释出的速度愈快;反之则愈小、愈慢。细胞膜内外酶浓度差因酶而异,且随组织不同而不同。如肝细胞内LD较细胞外液高3 000倍以上,而RBC中此酶为血浆的200倍。 2.酶的相对分子量 酶的相对分子量大小反映了酶分子的大小,是影响细胞内酶释出的关键,各种酶从胞内释出的速度与酶的相对分子量成反比。例如在AMI时,血中最先升高的CK分子量为8.5万,而分子量为12.5万的LD出现升高明显推迟。 3.酶的组织分布 含酶
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