《开题报告_脂肪酶的固定化研究》-毕业设计(论文).docVIP

《开题报告_脂肪酶的固定化研究》-毕业设计(论文).doc

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毕业论文开题报告 选题背景和意义 一.选题背景 (1)脂肪酶的应用 脂肪酶是一类特殊的酰基水解酶,它能在油水界面上催化酯水解和醇解、酯合成、酯交换、内酯合成、多肽合成、高聚物合成及立体异构体拆分等有机合成反应,是目前被重点研究的酯催化剂。脂肪酶也是一种重要的工业酶类,应用于油脂水解、食品风味和香味的改进、医疗医药、皮革绢纺脱脂等优质化工和有机合成工业中。脂肪酶催化的反应具有条件温和、耗能低、原料要求低、成品质量高等优点,尤其是1,3一专一性脂肪酶,可用于特殊脂肪酸、单甘酯的合成及立体选择性化学合成和分解,具有巨大的应用潜力。随着人们生活水平的提高,在食品、牛奶、香水、化妆品和医药中添加天然成分的产品越来越受消费者青睐。由天然底物生物合成的化合物被认定为天然产物,而同样的原料用化学法生产的产物则不受欢迎。因此,天然成分在今后将会具有很大的需求,这使生物催化剂极具吸引力,所以说,脂肪酶在油脂、食品、医药、化妆品等领域具有光明的应用前景。 (2)应用中出现的问题 在利用脂肪酶催化反应进行工业化生成遇到了一些问题,归纳起来主要有以下几个方面: 1)酶的分离困难,反应结束后难以从反应液中回收尚未变性的脂肪酶加以重复利用,难以实现过程的连续化。 2)酶在非水溶液中不溶解,反应过程中容易结块,大大降低了酶的利用率。 3)脂肪酶催化反应的底物油脂不溶于水,因而必须加入合适的溶剂或乳化剂使酶分子与底物分子紧密接触。这样易使产品被残余酶活污染,不易储存,必须进行后处理。 4)对单级反应器,脂肪酶的使用寿命受反应器空时的制约,使脂肪酶的部分潜在酶活受到损失。 5)脂肪酶价格昂贵,使用一次就废弃,对酶的利用很不经济,成本太高。 二.选题意义 正是由于游离脂肪酶在催化反应中存在缺点,因此难以实现工业化应用。为此,许多研究者展开了对脂肪酶进行固定化的研究,寻找解决脂肪酶的工业化应用问题。同时,固定化技术一直也是学术界和工业界的接触点和共同热点。可以说固定化脂肪酶技术成功与否是利用脂肪酶催化生产工业化应用的关键。 我们目前所做的课题是研究将米曲霉发酵产生的脂肪酶进行固定化,用米曲霉生产脂肪酶这一微生物方法具有生产周期短,产量大,可大规模工业化生产等优点;而脂肪酶固定化后具有以下优点:(1)容易从产品中分离,可再生利用;(2)在反应器内位置固定;(3)稳定性高,可长时间连续操作;(4)保留活性,并有获得超活性的可能;(5)资源方便可以减少污染; 但是固定化脂肪酶的性能在很大程度上主要取决于载体的选择,所以我们的课题主要对固定脂肪酶的载体的挑选,寻找最佳的载体,以提高固定化脂肪酶的各方面性能。 二.国内外研究现状 一.固定化酶概念界定及发展历程 所谓固定化酶是指在一定空间内呈闭锁状态存在的酶, 能连续地进行反应, 反应后的酶可以回收重复使用。与游离酶相比, 固定化酶具有的优点: 可以在较长时间内反复利用, 反应过程可以严格控制, 有助于提高酶的稳定性, 酶易于与底物和产物分开, 增加产物的收率,提高产物的质量, 提高酶的使用效率, 成本降低等。 1916年美国科学家NELSON和GR IFFIN最先发现了酶的固定化现象。直到20世纪50年代, 酶固定化技术的研究才真正有效地开展。1953 年, 德国科学家GRUB2HOFER和SCHLEITH 首先将聚氨基苯乙烯树脂重氮化,然后将淀粉酶、胃蛋白酶、羧肽酶和核糖核酸酶等与上述载体结合制备固定化酶。到20世纪60年代, 固定化技术迅速发展。1969年日本千畑一郎利用固定化氨基酰胺酶从DL- 氨基酸生产L- 氨基酸, 是世界上固定化酶大规模应用的首例。在1971年的第一届国际酶工程会议上,正式建议使用固定化酶( mi mobilized enzyme)这个名称。我国的固定化酶研究开始于1970年, 首先是中国科学院微生物所和上海生化所的酶学工作者同时开始了固定化酶的研究工作。此后, 许多单位相继对固定化酶和固 定化细胞进行了应用研究 二.脂肪酶及其固定化方法研究 (1).脂肪酶的研究概况 脂肪酶(L ipase EC3. 1. 1. 3,甘油酯水解酶)是水解油脂的酶类。脂肪酶的水解底物一般是天然油脂,其水解部位是油脂中脂肪酸和甘油相连接的酯键;脂肪酶的另一个重要特点是它在异相系统,即油一水界面上作用。脂肪酶在动植物各种组织及多种微生物中〔1〕普遍存在。人们对脂肪酶的研究已有上百年的历史,是最早被研究的酶类之一。早在1834年首次报道了兔胰脂肪酶的活性; 1858年报道了胃脂肪酶的活性; 1871年报道了种子脂肪酶;而微生物脂肪酶直到本世纪初才发现。 经过各国科学工作者的努力,微生物脂肪酶的研究与应用取得了相当大的发展,已有多种微生物脂肪酶获得纯化。脂

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