生物化学 DAG-PKC信号传递途径 课件.ppt

参与细胞凋亡的主要成员： 死亡受体途径：FasL-Fas/CD95 , TNF-TNFR 2. 蛋白水解酶（Caspase 1-14，30?50KD酶原形式） caspase：cysteine aspartate-specific protease 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 线粒体途径：Cyt.c， Bcl-2蛋白家族, Apaf-1, DNA内切核酸酶 ? Caspase分两大类（人类有11种）： （一） 参与炎症反应 包括：Caspase-1、4、5、11、12和14； （二） 参与细胞凋亡 凋亡起动酶——Caspase-8和9； 凋亡效应酶——Caspase-3、6和7. ? Bcl-2蛋白家族（分以下三类）： 抗凋亡— 促凋亡— 2.2.1 DAG的生成 CAs →?1R → Gq→ PLC? EGF →EGFR(RTPK)→ PLC? DAG CH2-OOC-R1 CH2-OOC-R1 CH2-00C-R1 CH –OOC-R2 CH-OOC-R2 CH-OOC-R2 CH2-O-P-o-CH2CH2-N+-(CH3)3 CH2-O-P CH2OH P P PC-PLD P 磷脂酰胆碱(PC) 磷脂酸(PL) DAG (参与长期应答) PIP2 2.2 DAG-PKC信号传递途径 (参与短期应答) 2.2.2 DAG 激活蛋白激酶C PKC 的种类与结构 单链多肽，586 ? 737aa, 67?83KD, 12种亚型分为三大组： 典型PKC 新型PKC 非典型PKC ? 绞链区 PKC从功能上分： 4个保守区（C1?C4）被5个可变区(V1?V5)间隔开 C1区：富含Cys，是DAG和PS的结合部位，同时含有假底物序列； C2区：是Ca2+结合部位； C3区：是ATP结合部位； C4区：是底物结合部位及酶活性区，可催化底物发生磷酸化 由于各类PKC肽链N端调节区结构差异大，因而具有不同 的活化机制。 （2） PKC 的活化过程 ① cPKC cPKC cPKC-Ca2+ cPKC-Ca2+-DAG 活性酶 ② nPKC nPKC nPKC－DAG 活性酶 ③ aPKC aPKC－PS 活性酶 Ca2+ DAG 绞链区断裂 DAG诱导 PS辅助 蛋白酶 DAG 绞链区断裂 PS辅助 蛋白酶 绞链区断裂 蛋白酶 “引爆复合物” 2.2.3 PKC的调节作用 （1） 参与代谢的调节 ① 糖原合酶磷酸化而失活→↓糖原合成； ② HMG-CoA还原酶磷酸化而失活→↓胆固醇合成。 （2） 参与Ca2+稳态的调节 PKC使质膜上的钙泵磷酸化而活化→↑Ca2+外流 （3）参与膜受体功能的调节 PKC使RTPK胞内侧Ser/Thr发生磷酸化修饰，使受体钝化 （4） 调节靶基因转录 TPA反应元件(TRE) NF-?B转录因子 血清反应因子(SRF) ① TPA反应元件（TRE）途径 受DAG-PKC调控的一段DNA碱基序列－－TGAGTCA－－被称为TPA反应元件。 TPA——佛波醇酯，具有与DAG相似的性质，可以代替DAG激活PKC,作用于TGAGTCA，影响基因表达。 在DAG-PKC途径中， 生长因子→RTPK→PLC?→DAG→PKC→进入核→使核内蛋白磷酸酶（PP）磷酸化而活化→活化PP可使核内激活蛋白－1（AP-1）脱磷酸而活化→活化AP-1与TPA反应元件（TRE）结合 → 基因表达→促进细胞生长、增殖、迁移。 TPA (CDK2、Rb、P21、P27、膜蛋白) ② NF-?B 反应途径