促红细胞生成素B螺旋表面肽的代谢稳定性结构修饰设计合成及其提高的肾保护作用.pdfVIP

中国科学: 化学 2013 年 第43 卷 第8 期: 1033 ~ 1040 SCIENTIA SINICA Chimica SCIENCE CHINA PRESS 自然科学基金项目进展专栏 论 文 多肽化学专刊 促红细胞生成素 B 螺旋表面肽的代谢稳定性结构 修饰: 设计、合成及其提高的肾保护作用 ①② ② ③ ③ ③* ②* 彭电 , 许忠良 , 杨橙 , 戎瑞明 , 朱同玉 , 龙亚秋 ① 长沙医学院药学系, 长沙 410219 ② 中国科学院受体结构与功能重点实验室; 中国科学院上海药物研究所药物化学实验室, 上海 201203 ③ 上海市器官移植重点实验室; 复旦大学附属中山医院泌尿外科, 上海 200032 *通讯作者, E-mail: yqlong@; tyzhu@ 收稿日期: 2013-05-20；接受日期: 2013-06-15; 网络版发表日期: 2013-06-21 doi: 10.1360/032013-180 摘要 肾脏缺血缺氧以及再灌注过程都将导致肾小管上皮细胞凋亡, 使肾功能严重受 关键词 损. 肾脏的缺血再灌注损伤是移植肾功能延迟恢复的主要原因并能诱导急慢性排斥, 环肽 代谢稳定 影响肾存活率. 近年来发现, 衍生于促红细胞生成素(EPO)的 B 螺旋亚基亲水表面序列 促红细胞生成素 的肽链(HBSP), 对肾脏缺血再灌注损伤具有显著的保护作用, 但其在体内极短的半衰期 微波辅助 (约2 min)极大地限制了它的临床应用. 因此, 本研究采用构象约束、全D-构型氨基酸替换 多肽合成 和N-端封闭策略, 设计了3 种类型的EPO B 螺旋表面肽衍生物, 旨在提高其代谢稳定性. 缺血再灌注损伤 环肽的设计采用了对氧化还原稳定的硫醚键和相对刚性的亚砜键两种环合方式. 在多肽 肾移植 的合成上, 采用微波辅助多肽自动合成和手工合成两种模式有机结合; 优化了硫醚环合 组织保护作用 工艺, 应用微波加热进行硫醚环肽的合成, 大大提高了产率和效率; 利用圆二色(CD)谱确 定了亚砜环肽的相对构型. 活性实验表明, 相对于线性母肽 HBSP, 本文设计合成的代谢 稳定衍生肽对大/小鼠肾脏缺血再灌注损伤均有显著提高的保护作用, 且硫醚和 R-构型亚 砜环肽的肾脏保护活性强于 S-构型亚砜环肽. 而且, 环化确实提高了功能肽的血浆稳定 性. 因此, 本文合成的硫醚环肽一周一次注射剂量等效于线性肽HBSP 一日三次剂量对小 鼠肾损伤的保护作用. 1 引言 延迟恢复甚至慢性肾损伤, 严重影响手术效果和病 人预后[6~9]. 虽然肾脏 IRI 的实验及临床研究不断深 肾脏缺血缺氧导致能量代谢不足和腺苷三磷酸 入, 许多具有肾脏保护作用的药物被开发出来, 但总 (ATP)过度耗竭, 再灌注过程又产生大量氧自由基, 体上疗效均不确切[10]. 二者均可导致肾小管上皮细胞凋亡, 使肾功能严重 促红细胞生成素(erythropoietin, EPO)在临床上 受损[1~5]. 临床上引起肾脏缺血再灌注损伤(ischemia 广泛用于改善尿毒症患者的肾性贫血[11, 12], 近年来 re