医学免疫学实验之凝集反应和沉淀反应.pptVIP

医学免疫学实验 第2次 凝集反应与沉淀反应 试管凝集（操作） 双向扩散（操作）、对流免疫电泳（示教） 抽血（每组一人，下次实验用） 肥达反应 原理 方法 肥达反应结果（观察结果注意：勿摇；先看对照管） - 不凝集 + 小部分凝集，管底小量凝集，上层液体较混浊 ++ 部分凝集，管底部分凝集，上层液体微混浊 +++ 大部分凝集，凝块非全部下沉于管底而是稍有铺开，上层液体澄清 ++++ 完全凝集，管底有边缘不整齐的膜状凝集块，上层液体澄清透明。 沉淀反应 Precipitation Tests Single immunodiffusion Double immunodiffusion Immunoelectrophoresis 双向免疫扩散法检测血清中AFP 制备琼脂板（5ml），琼脂凝固后打孔。 加样 中间孔加抗AFP抗体 1、4孔加AFP阳性对照 2、3、5、6孔加待检血清 置于湿盒，37?C 24h 对流免疫电泳检测血清中AFP 1、3孔加抗AFP抗体 2孔，AFP阳性对照血清 4孔，待检血清 pH 8.6巴比妥缓冲液 第2次 凝集反应与沉淀反应 试管凝集（操作） 双向扩散（操作）、对流免疫电泳（示教） 抽血（每组一人，下次实验用） RPR是心脂质（而不是密螺旋体的）梅毒抗体试验，在疾病初期呈阳性。将病人血清与炭联心脂质抗原试剂混合，阳性血清显示凝集抗原颗粒。(4分钟后观察颗粒凝集） * RPR 1:160 0.5 0.5 0.5 3 1:320 0.5 0.5 0.5 4 摇匀，37?C，18～24h 对照 1:1280 1:640 1:80 1:40 最终稀释度 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 菌液(H) - 0.5 0.5 0.5 0.5 1:10病人血清(ml) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 生理盐水(ml) 7 6 5 2 1 试管号 0.5弃去 结果（下周观察） 注意： 1 血清倍比稀释时，吹吸3次，从管底吸，沿管壁吹。 2 血清稀释后，菌液要从低浓度加起 Single immunodiffusion Double immunodiffusion 抗AFP抗体 1 2 3 4 5 6 结果下周观察 学号 1 2 3 4 + - Macroscopic agglutination of latex(乳胶颗粒) coated with human IgG serum from a patient with rheumatoid arthritis. Normal serum Patient’s serum 类风湿因子的检测 梅毒快速血清反应素RPR试验 * RPR * *