基础化学理论第13章 可见分光光度法和紫外分光光度法.pptVIP

1. 波长： λ(max) ε最大 2. 显色剂及用量 3. 溶液酸度 4.显色时间与稳定时间 5. 干扰物的掩蔽 6. 合适的浓度范围 线性范围及吸光度 7.选择适当的参比溶液 测量条件的选择 M + R === MR (被测物) (显色剂) (有色产物) ε↑，灵敏度↑。 ε≥10000 灵敏度高 选择性好 生成的有色物质应有确定的组成 生成的有色物质应稳定 显色剂在测定波长处无明显吸收 选择适当的显色剂 控制显色反应的酸度，使显色剂仅与被测物质起反应 加入掩蔽剂，使其与干扰离子生成更稳定的无色配合物，而与被测定物质和显色剂不发生反应 在测定前预先通过离子交换、沉淀分离或溶剂萃取法等分离干扰离子 共存离子的干扰及消除 T = 36.8% (A=0.434) 时， △C / C最小。 控制范围：T：20%~65%，A：0.7~0.2 测量误差和透光率的关系 浓度的相对误差与透光率的关系 相对误差为 普通分光光度计由于 读数分辨率引起的透光率测量误差 ?T 一般约为?0.01 ~ ?0.02。若??T ? = 0.01，则将不同的T值代入上式可得到相应的相对误差和透光率的关系图。 例13-2 某试样用2cm比色皿测量时，T＝60％，若改用3cm比色皿时，T和A各等于多少？ 解：根据朗伯－比耳定律 A = ? b c 分光光度法测定溶液中总铁离子的含量 实验原理 Fe2+ + 3 phen ＝Fe(phen)3] 2+ 橙红色 λ测 = λmax = 508 nm 邻菲罗啉 总铁离子： Fe2+，Fe3+ 标准曲线法 A试样 比色 管序号 Fe2+标液 (mL) HAc－NaAc (mL) 盐酸羟 胺(mL) 邻菲罗 啉(mL) 总体积 (mL) A Fe2+浓度 mg/25.00mL 1 2 3 4 5 6 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50 2.50 25.0 25.0 25.0 25.0 25.0 25.0 0.0000 0.0100 0.0200 0.0300 0.0400 0.5000 试样 (10.00ml) 2.50 1.00 2.50 25.0 标准溶液及试样溶液的配制 C (Fe2+ = mol.mL-1) 0.0100 小结 分光光度法的原理、特点和基本概念 Lambert-Beer定律的数学表达式及计算，吸光度和透光率 分光光度法定量分析方法 分光光度计的组成及其作用 分光光度法误差的来源，提高灵敏度和准确度的方法 * 然后将被测溶液置于吸收池中，在 相同条件下，测量其吸光度，根据吸光 度即可在标准曲线上查得其对应的含量。 由于被检测的样品浓度实际上是与多个 标准溶液的浓度相比较而得出的结果， 所以结果准确和可信。采用此法时，应 使标准溶液与被测溶液在相同条件下进 行测量，且溶液的浓度应在标准曲线的 线性范围内。 在测定溶液吸光度时，为了消除 溶剂或其它物质对入射光的吸收，以 及光在溶液中的散射和吸收池界面对 光的反射等与被测物吸收无关的因素 的影响，必须采用空白溶液 (blank solution) 作对照。在可见光区常用的 空白溶液有下列三种: 1. 溶剂空白 当显色剂以及制备试液 的其它试剂均无色，可用溶剂作空白溶 液。 2. 试剂空白 若显色剂有色，试样溶 液在测定条件下无吸收或吸收很小时， 可用试剂空白进行校正，也就是按显色 反应相同的条件加入各种试剂和溶剂(不 加被测试样溶液)后所得溶液，相当于标 准曲线法中浓度为“0”的标准溶液。 3. 试样空白 当试样基体有色(如试 样溶液中混有其它有色离子 )，但显色 剂无色，且不与 试样 中 被测成分以外 的其它成分显色时，可用 试样 空白 校 正。也就是不加 显色剂但按 显色 反应 相同条件进行操作的试样溶液。 * 在分光光度法测量中，当在吸光度 很高或很低的范围内进行定量分析时， 相对误差比较大。差示分光光度法是用 比试样溶液浓度稍小或稍大的溶液作参 比溶液，这样测得的吸光度 A实际上是 试样溶液吸光度Ax和参比溶液的吸光度 As的差值 设对于空白溶液来说，透过光强