分子生物学定点诱变和蛋白质工程 .pptVIP

第九章 定点诱变与蛋白质工程 山东大学医学院生物化学 与分子生物学研究所 刘贤锡 蛋白质在生命现象中具有重要作用，在医药、轻工等行业也具有重要作用，如胰岛素、枯草杆菌蛋白酶等； 天然生物材料中蛋白质含量较少； 基因克隆技术克隆基因，在宿主细胞中可表达特定蛋白质（重组蛋白）； 多数天然蛋白质的理化特性不能适应于工业用途; 利用现代分子生物学技术，改变克隆基因中的特定基因，即可表达出适合于商业用途的蛋白质。 在体外，通过碱基取代、插入或缺失的方法，使基因DNA序列中的某个特定碱基发生改变，从而改变蛋白质的结构，称为蛋白质工程。 通过蛋白质工程，人们可以随心所欲地改变蛋白质的结构及其理化性质和生物学功能。例如，我们可以利用蛋白质工程改变酶的Km、Vmax，酶促反应的最适温度、最适pH值、酶促反应的特异性以及酶蛋白的稳定性等。 蛋白质工程的主要技术之一是定点诱变技术. 第一节 定点诱变 一、定点诱变的概念 利用分子生物学技术，在体外通过碱基取代、插入或缺失可以使基因DNA序列中任何一个特定的碱基发生改变。这种体外特异性改变某个碱基的技术，称谓定点诱变（site directed mutagenesis）。