酶工程原理及应用-04 05 酶的工程化改造(分子修饰和固定化).pptx

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酶工程 (原理及应用); 随着酶催化应用范围的不断扩大和研究的逐步深入,研究者发现,酶催化的精确性和有效性常常不能很好地满足酶学研究和工业化应用的要求,而且天然酶的稳定性差、活性低使催化效率很低,还缺乏有商业价值的催化功能。;现代酶工程的要求;酶应用过程中的一些不足;第四章 酶的分子修饰(改造);一、分子修饰的基本原理及策略;1、酶分子修饰基本原理;酶分子修饰的意义;酶分子修饰的基本策略(1) ;酶分子修饰的基本策略(2);二、常用的修饰方法原理;2、酶分子的修饰方法 ;(1) 酶的金属离子置换修饰;金属离子置换修饰的过程 ;(2) 酶的大分子修饰 非共价修饰;(2) 酶的大分子修饰 非共价修饰;大分子修饰(共价)的过程;聚乙二醇是线性分子具有良好的生物相容性和水溶性,在体内无毒性、无残留、无免疫原性,并可消除酶的抗原性,使其末端活化后可以与酶产生交联,因而,它被广泛用于酶的修饰。;;;PEG-INF的制备过程;引入巯基的方法制备PEG修饰蛋白;聚乙二醇修饰剂产品;IEF和SDS鉴定PEG修饰蛋白;RP-HPLC分析胰蛋白酶切片段;质谱分析胰蛋白酶切片段;PEG修饰蛋白的结构鉴定;RP-HPLC分析PEG修饰蛋白;(3) 酶分子的侧链基团修饰;催化活性/非催化活性基团的修饰;常见基团的化学修饰反应:羧基;常见基团的化学修饰反应:氨基;常见基团的化学修饰反应:巯基;常见基团的

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