色谱原理及应用2.ppt

色谱分析原理及应用;★高效分离：复杂混合物中组分分离技术 ★兼容性强：联用各鉴定方法实现技术集成 ★应用最广：分析化学仪器/方法;资料来源：Global Industry Analyst, Inc. HPLC Systems Accessories. 2008 ;?分析效率高：可把组分复杂的样品快速分离成单组分 ?检测灵敏度高：可作超纯气体、高分子单体的痕迹 量杂质分析和空气中微量毒物的分析 ?样品用量少：一般气体样用几毫升，液体样用几微 升或几十微升 ?选择性好：可有效地分离性质极为相近的各种同分 异构体和各种同位素 ?易于自动化。;分析化学的特点和趋势;★ 技术整合：多维分离、检测器联用 ★ 新型分离材料：色谱柱固定相 ★ 新型分离原理：超临界流体、毛细管电泳 ★ 前处理技术：在线富集、直接进样 ★ 微流控芯片：多功能化、微型化、集约化;色谱在分析化学中的应用;目 录;色谱学基本原理;原理： 组分“赛跑”;分离原理——组分“赛跑”;1903年，Tswett （俄国植物学家）， 用碳酸钙分离植物色素时出现色带， “色谱法”因之得名。;色谱法概念的扩展;色谱法的分类;经典色谱法发展历程;二、色谱过程和基本概念;（二）色谱流出曲线及有关术语;噪音(noise) ：基线信号的波动。 通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。;（二）色谱流出曲线及有关术语;（二）色谱流出曲线及有关术语;（二）色谱流出曲线及有关术语;正常峰（对称）： 不良峰;三、色谱法基本理论;2. 容量因子或分配比或质量分配系数（ｋ）;3.分配系数、容量因子与保留时间的关系;4.分配系数、容量因子与色谱分离;1. 塔板模型与基本假设;模型基本假设：;2. 质量分配与转移规律; 2. 质量分配与转移规律; 2. 质量分配与转移规律;; 正态分布函数式;;; 有效塔板数和有效塔板高度;;;两组份间分配系数K值不同从热力学上说明两组份可以分离。然而，实际实验中是否能分离则要从动力学方面去优化和选择合适的条件，以达到分离的目的。;;;（2）分子扩散项 (纵向扩散项)： ;;（3）传质阻力项C： ;;;;;;四、分离效能及其影响因素; ;①柱效较高，△K(分配系数)较大，完全分离； ②柱效较高，峰型好， △K不是很大，基本上完全分离； ③柱效较低，峰型展宽，△K较大，但分离的不好； ④柱效较低，峰型展宽， △K小，分离效果更差。;四、分离效能及其影响因素;四、分离效能及其影响因素;1. 分离度与柱效 分离度与柱效的平方根成正比，k、α一定时，增加柱长，可提高分离度，但组分保留时间增加且峰扩展，分析时间长；设法降低H最有效。;色谱分析的意义;;定量分析;色谱分析原理及应用;;气相色谱系统构成;;将流动相中组分的浓度或量信号转变成电信号。;热导检测器（thermal conductivity detector；TCD） ;氢焰离子化检测器（hydrogen flame ionization detector；FID） ;二、质谱检测器;二、质谱检测器;*;*;;二、质谱检测器;气质联用（GC-MS） 气质联用是对气相色谱-质谱联用技术的简称，是将气相色谱仪器（GC）与质谱仪（MS）通过适当接口相结合，借助计算机技术，进行联用分析的技术。GC-MS是最成熟的两谱联用技术。;1.GC-MS的接口： 由GC出来的样品通过接口进入到质谱仪，接口是色质联用系统的关键。 接口作用： 压力匹配——质谱离子源的真空度在10-3Pa，而GC色谱柱出口压力高达105Pa，接口的作用就是要使两者压力匹配。 组分浓缩——从GC色谱柱流出的气体中有大量载气，接口的作用是排除载气，使被测物浓缩后进入离子源。 常见接口技术有：分子分离器连接（主要用于填充柱）；直接连接法（主要用于毛细管柱）；开口分流连接（放空一部分色谱流出物，让另一部分进入质谱仪。此法样品利用率低。）;*;*; 2. ;3. ;3. ;4. ;5. ;;;;;;;;;液相色谱发展历史;色谱法分析对象;液相色谱：以液体作为流动相的色谱分离方法 适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物的分析 流动相具有运载样品分子和选择性分离的双重作用;一、液相色谱分类;固定相与流动相;色谱柱分离材料;键合固定相制备;反相色谱（RP）;RP相互作用力是什么?;分析条件 柱: Shim-pack CLC-ODS 流动相: MeOH : H2O = 7:3 流速: 1.0 mL/min 温度: 40℃ 进样体积: 10 ?L 检测器: UV-254 nm