生物竞赛生化部分2.pptVIP

 分子生物学的基本法则，是1958年由克里克(Crick)提出的遗传信息传递的规律，包括由DNA到DNA的复制、由DNA到RNA的转录和由RNA到蛋白质的翻译等过程。  DNA通过复制将遗传信息由亲代传递给子代；通过转录和翻译，将遗传信息传递给蛋白质分子，从而决定生物的表现型。DNA的复制、转录和翻译过程就构成了遗传学的中心法则。 中心法则： DNA 复制 RNA 转录 蛋白质 翻译 ? 中心法则 重点 DNA的复制（以DNA为模板合成DNA） RNA的转录（以DNA为模板合成RNA） RNA的逆转录（以RNA为模板合成DNA） RNA的复制（以RNA为模板合成RNA） 以RNA为模板，即按照RNA中核尊酸顺序合成DNA（称逆转录）此过程中需要的酶是＿。A．DNA指导的DNA聚合酶 B．RNA指导的RNA聚合酶C．RNA指导的DNA聚合酶 D．DNA指导的RNA聚合酶 一. DNA的复制 复制部位： 真核生物：细胞核 原核生物：细胞质的核质区 一：对DNA分子复制的推测： 半保留复制模型 沃森和克里克认为： 原有DNA分子的两条单链会分开，每一条单链各作为一个模板用来复制新的单链，所以新合成的DNA分子中有一条旧链和一条新链。 按半保留复制方式，子代DNA与亲代DNA的碱基序列一致，即子代保留了亲代的全部遗传信息，体现了遗传的保守性。 半保留复制的意义 遗传的保守性，是物种稳定性的分子基础，但不是绝对的。 原核生物复制时，DNA从起始点(origin)向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制。 二、双向复制 三、复制的半不连续性 领头链 (leading strand) 随从链 (lagging strand) 参与DNA复制的物质 底物(substrate): dATP, dGTP, dCTP, dTTP 聚合酶(polymerase): 依赖DNA的DNA聚合酶，简写 为 DNA-pol 模板(template) : 解开成单链的DNA母链 引物(primer): 提供3-OH末端使dNTP可以依次聚合 其他的酶和蛋白质因子 1.1DNA复制的条件 一、底物 以四种脱氧核糖核酸(deoxynucleotide triphosphate)为底物，即dATP，dGTP，dCTP，dTTP。 二、模板(template) DNA复制是模板依赖性的，必须要以亲代DNA链作为模板。亲代DNA的两股链解开后，可分别作为模板进行复制。 三、引物 引物（primer），是一小段单链DNA或RNA，作为DNA复制的起始点，在核酸合成反应时，作为每个多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链，在引物的3′-OH上，核苷酸以二酯链形式进行合成，因此引物的3′-OH，必须是游离的。 四、DNA聚合酶  DNA聚合酶（DNA polymerase）是细胞复制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板，从将DNA由5端点开始复制到3端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成（在具备模板、引物、dNTP等的情况下）及其相辅的活性 五、DNA连接酶 DNA连接酶(DNA ligase)可催化两段DNA片段之间磷酸二酯键的形成，而使两段DNA连接起来。 DNA连接酶催化的条件是： ① 需一段DNA片段具有3-OH，而另一段DNA片段具有5-Pi基； ② 未封闭的缺口位于双链DNA中，即其中有一条链是完整的； ③ 需要消耗能量，在原核生物中由NAD+供能，在真核生物中由ATP供能。 解螺旋酶 解螺旋酶（unwinding enzyme） ，又称解链酶或rep蛋白，是用于解开DNA双链的酶蛋白，每解开一对碱基，需消耗两分子ATP。目前发现存在至少存在两种解螺旋酶。 1.旋转酶解开超螺旋。 1.3过程 旋转酶 2.解螺旋酶在起点双向打开螺旋 起点 解螺旋酶——解开双链 解螺旋酶 3.DNA结合蛋白与单链结合并向前移动 DNA结合蛋白 提问：DNA结合蛋白的作用？ A T G C 防止单链复合 6.新链5`→3`延长（复制DNA） 5.引物3`连接dXTP 7.均以5｀→3｀方向形成前导链和滞后链 由冈崎片段连接成的新DNA链称滞后链。 与复制叉移动方向相同，可以一直复制到底的新DNA链称前导链。 5` 3` 5` 8.切除引物，补缺。 DNA聚合酶3`→5`核酸外切 连接酶连接缺口 c切除引物、切除配错dXTP 新链 半保留——复制结果 半不连续——复制过程 DNA复制过程总结： 1.旋转酶解开超螺旋。 2.解螺旋酶在起点双向打开螺旋 3.DNA结合蛋白与单链结合并向前移动 4.RNA聚合酶催化起点处通过碱基互补连接引物