微透析的应用和进展.pptVIP

微透析技术应用进展;;;微透析技术的基本原理;活体微透析技术原理示意图;;;微透析技术的发展沿革;微透析技术的发展沿革;;活体(In vivo)、实时（In time）、在线（On line） 时间分辨性 空间分辨性 提供游离态小分子化合物,对药物研究有重要意义 样品因不含蛋白质、酶等大分子物质，可不经预处理直接用于测定 ;不足： 回收率低 ,通常在 15%左右 探针的植入会造成局部轻微的损伤。 回收率的测定虽然种类繁多,但每种方法都不够完善,影响了实际浓度的计算 要求探头必须准确插在同一取样部位 很难进行以秒为单位的动态观察 ;微量灌流泵 探针 灌流液 收集器 分离检测装置 ;A— 灌注液(在透析针内); B—灌流泵; C—连接管; D—样品收集; E—微透析探针;微透析探针;微透析探针的种类;;;;灌流液;样品收集;样品检测;样品检测;;基于分离的微透析方法(separation based approaches)： 主要有高效液相色谱法(HPLC)和毛细管电泳法(CE)。微透析样品属于亲水性物质的离子性溶液 与非分离的微透析方法相比，基于分离的微透析方法一般可以同时测定多个化合物。 一般来说，根据检测物质的不同，紫外、荧光、电化学检测和质谱法是HPLC常用的检测方法。而CE常用电化学检测器和激光诱导荧光法检测。 ;;在线微透析液相色谱电喷雾质谱偶联装置示意图;;等电电点聚焦-微透析-质谱联用;高效液相离子色谱在线微透析质谱联用示意图;;;微透析回收率的测定方法：;;;;;;;;应用微透析技术检测的相关物质;;;;;;;神经药理学研究领域 药效学研究 通过分析透析液中内生的神经递质、神经调质,可直接衡量药物的治疗效果,有助于探讨药物作用的机理。 Hargreaves利用微透析技术监测了接受手术去除受损磨牙的患者,发现预先服用甲基泼尼松龙可使缓激肽释放减少。;神经药理学研究领域 药物代谢研究 微透析技术比传统技术更加清楚、全面地反映了药物在体内的中间代谢过程。 Scott 等应用微透析技术,通过监测扑热息痛和它的葡糖苷酸浓度-时间变化来研究其药动学和药代学;神经药理学研究领域 药动学研究 早期的微透析药动学研究主要是在中枢神经系统,最近也有用于其它各种不同组织研究的报道,而阐明中枢药物的作用机制对于研究药物与血脑屏障的关系很有意义。 Tsai 等从血液、海马区和胆汁 3 个方面同步使用微透析探针进行了黄芩素的药物动力学研究。 ;临床诊治 临床目前主要涉及颅脑损伤、蛛网膜下腔出血、癫痫、帕金森氏病、脑肿瘤等领域。 国外微透析技术和设备已逐渐标准化,被作为一种常规方法用于神经外科手术和神经病变的监护治疗,并能提供正常参考值来评价患者透析期间的变化,大大降低患者的死亡率。有研究显示,微透析能在患者脑缺血局部脑氧分压和脑血流量出现变化后5～30 min即发现代谢物浓度的变化,早于临床症状,为临床治疗提供更大的空间。 ;临床诊治 用来选择具穿透力的抗肿瘤化疗药物 作为抗微生物药物“组织穿透力”的鉴定方法。;中医药研究领域 在脑变性研究方面的应用 陈氏等应用微透析发现黄芪皂苷不能降低缺血/再灌时谷氨酸的释放。 有学者应用脑内微透析技术观察发现,丹参通过降低半胱氨酸、谷胱甘肽、兴奋性氨基酸及 NO 代谢产物水平发挥脑保护作用。;中医药研究领域 在针灸治疗方面的应用 人体经络是一个完整的、动态的系统,只有在线研究能考察针刺部位所产生的一系列生理变化。微透析的在线、多靶点监测特点全面反映了考察针刺反应的起效部位、微环境的变化,有可能成为诠释经络、腧穴功能的有力工具。 郭氏等采用微透析技术研究发现,电针可抑制细胞外兴奋性氨基酸的过量堆积。;;中医药研究领域 在中药现代化研究中的应用 中药的研究已达到分子、基因水平,微透析所提供的药物浓度-时间动态变化的数据将使中药有效单体研究更加准确,成为分析并揭示中药有效成分及作用机制的重要技术支持,对中药现代化有巨大的推动作用。 利用微透析技术研究表明,3味中药(主要成分为川芎嗪、天麻素、麻黄碱等)能显著增加抑制性氨基酸,为揭示其治疗脑血栓的机理提供帮助。;;微透析技术应用的局限性：; 自1972 年Delgado发明第一根微透析探针至今已有37年，微透析技术随着科技的进步得到了长足的发展，未来的微透析技术前景广阔，将会在医药乃至更多领域一展雄风。