大鼠高尿酸血症模型的建立.docVIP

第28卷第3期 2011年6月 实验动物科学 LABORATORY ANIMAL SCIENCE V01.28No.3 June 2011 妒切h驴叼h驴‘,驴勺 令研究?论著§ 勃、盔h驴、毋斗qp、加 大鼠高尿酸血症模型的建立幸 杨桂梅1黄胜华2连希艳2刘 英1解宇环1 (1.昆明医学院,云南昆明650031(2.昆明医学院第二附属医院。昆明650101 摘要:目的建立大鼠高尿酸血症动物模型。方法采用腺嘌呤、腺嘌呤加酵母、腺嘌呤加乙胺丁醇和氧嗪酸钾盐 不同剂量口服灌胃,测定实验前后大鼠血清尿酸、尿素氮、肌酐,并进行组织学病理切片观察。结果 氧嗪酸钾尿 酸升高平稳,并且对肾损伤不严重。结论用氧嗪酸钾建立大鼠高尿酸血症模型较合适。 关键词:SD大鼠;高尿酸血症;动物模型 中图分类号:R-332文献标识码:A 文章编号:1006—6179(201103-0025-04 高尿酸血症是指一种不伴有其他获得性疾病的 尿酸代谢障碍所致血清尿酸水平增高或尿酸盐沉积 和以痛风综合症为主的临床表现…。近年来,随着 人们的生活方式和膳食结构发生的重大改变,该病 的患病率明显增加,发病年龄持续低龄化旧q1。研 究发现,在原发性高尿酸血症患者中30%有肾脏损 害,是影响肾功能的独立危险因素H1。动物模型作 为研究疾病发病机制和药理药效的一种方法在科学 发展中有着非常重要的作用。本研究旨在建立稳定 的高尿酸血症动物模型,探讨高尿酸血症致肾脏损 伤的发病学机制,并通过干预治疗达到保护肾脏的 目的。 1材料和方法 1.1实验动物 SPF级SD大鼠72只,雄性,昆明医学院实验动 物中心提供[合格证号:SCXK(滇2005-0009],饲 养于昆明医学院动物实验室(屏障环境SPF级[合 格证号:SYXK(滇2005-0003]。动物适应性饲养1周,观察体表体征,自由饮水和采食。所有笼具、饲 料和饮水均经过121℃蒸汽灭菌处理。 1.2药品 腺嘌呤(Adenine,批购自杭州同 明医化科技有限公司;羧甲基纤维素钠(CMC,批 购自河北天伟化工有限公司;酵母 (Yeast,批购自江山生物制剂有限公 司;乙胺丁醇片(Ethambut01,批号T09i7530,购自 杭州民生药业集团有限公司;氧嗪酸钾(Oxonie acid,批购自济南中科一通化工有限 公司。肌酐试剂盒,批购自上海复星长 征医学科学有限公司;尿酸试剂盒,批号D091203, 购自南京建成生物工程研究所;尿素氮试剂盒,批号 L090303,购自上海复星长征医学科学有限公司。 1.3检测指标 血尿酸(UA,尿素氮(BUN,肌酐(CR采用 Beckman生化分析仪测定,肾组织切片采用HE染 色,光镜观察。 1.4实验方法 将雄性大鼠随机分为正常对照组、腺嘌呤组 (100mr,/kg、200ms/kg、腺嘌呤+酵母组(100ms/ kg+7.5g/kg、200mg/kg+15g/kg、腺嘌呤+乙胺 丁醇组(100mg/kg+250mg/kg、200mg/kg+250 ms/kg、氧嗪酸钾组(1.0g/kg、1.5g/kg,除正常 对照组外每种药物浓度和药物配比均为2组,共9组,每组8只大鼠,每组动物自由饮水、饮食。腺嘌 呤、氧嗪酸钾溶于0.5%的羧甲基纤维素钠溶液中, 酵母和乙胺丁醇片溶于蒸馏水中,正常对照组给予 收稿日期:2010—12—01 ‘基金项目:云南省教育厅资助项目(No:2009CDl73 作者简介:杨桂梅(1975一,女,硕士,主要从事实验动物学和药理学。E-mail:ynygm@yahooo.COIl!.eli 通信作者:连希艳,教授。研究方向:慢性肾小球硬化机制、代谢性肾脏病。 万方数据 ?26? 实验动物科学 28卷 0.5%羧甲基纤维素钠,均为口服灌胃给药,每日按 时按量灌服1次,实验共计30d。动物适应性饲养 1周,观察体表体征,符合实验要求后进行实验,实 验前、实验后第10天、第20天眼眶取血,分离血清, 实验第30天,2.5%戊巴比妥钠麻醉,股动脉取血处 死,取肾,分离血清,组织标本用10%甲醛固定,石 蜡包埋、切片、HE染色、光镜下观察大鼠肾组织一 般形态。 1.5统计方法 所有计量资料均以均数±标准差(i±s表示, 运用SPSS 11.5软件进行统计分析。组间比较用t 检验,多组均数采用方差分析,两两比较采用q检 验。P0.05为差异有统计学意义。 2结果 2.1实验前各组Uk,、BUN和CR测定 实验前,正常对照组、腺嘌呤组、腺嘌呤+酵母 组、腺嘌呤+乙胺丁醇组、氧嗪酸钾组血清尿酸、尿 素氮、肌酐水平比较差异均无显著性,见表1。 袭1实验前Uk.、BUN、CR测定结果 2.