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棒状薄层色谱简介及在分析脂类组成上的应用 周 波 相关概念 薄层色谱(thin layer chromatography，TLC)是一种简便、快速的微量色谱方法 流出曲线和色谱峰 棒状薄层色谱构成原理 板薄层 棒薄层 C:\Documents and Settings\zhoubo\桌面\色谱分离的过程原理.swf 氢火焰离子化检测技术 利用棒状色谱分析脂类组成 仪器 ：雅 特 隆 薄 层 色 谱分 析 仪 展开剂：正己烷：乙醚：甲酸=42：28：0.3 （分析纯即可）具体展开剂的选择依据不同样品而定 分析步骤 前期处理： 1、采用Folch法取得总脂 2、待测样品用氯仿稀释至10~20mg/ml 流程图 空白扫描 相关参数 1.空白扫描次数根据色谱棒的实际情况大致为3—5次 2. 点样时用微量点样器吸取1ul 3.展开槽中放入70ml左右展开剂，用滤纸润湿，形成饱和蒸汽 4.在60℃下，烘干5分钟 5.氢火焰，氢气流量为160ml/min,空气流量2L/min 数据处理和分析 根据显示的组份离子流图上峰的保留时间和出现的先后顺序，比照标准品的保留时间和先后顺序确定种类 燃烧离化后得到对应的组份离子流图，对出现的各组分对应的峰，积分得到峰与峰基线所包围的面积成为峰面积。 成分(％)=(峰面积／总峰面积)x100％ 事例 注意事项 由于温度以及展开时间等的影响实际操作中每次得到的离子流图与标准品的离子流图有着差异，可以根据峰出现的先后顺序确定组分。 样品浓度必须控制在10—20mg/ml，点样斑控制在3mm左右。 每次点样时保留一个空白，可以知道色谱棒是否被污染。分析时根据标准图谱剔除杂峰，计算总面积 * * 原理：组分不断被吸附剂（固定相）吸附， 又被展开剂（流动相）溶解而解吸附，且随之向前移动。 组成 吸附剂（固定相） 展开剂（流动相） 种类：常规的薄层色谱、高效薄层色谱、棒状薄层色谱、加压薄层色谱、胶束薄层色谱等等 色谱棒（组份分离工具） 氢火焰离子化检测技术 棒状薄层色谱 1976 年英国Padley 发明了棒状薄层色谱/氢火焰扫描法 原理：化合物燃烧裂解, 形成离子碎片和自由电子, 再由电极收集它们并产生与化合物量成正比的电流信号而测出各物质的含量 点 样 展开分离 干燥脱除展开剂 扫描检测 原点扫描 *