医学遗传与胚胎发育2.ppt

? 分子生物学的中心法则(central dogma) DNA RNA 蛋白质 第一节 DNA复制的几个基本原则（特点） 一 、半保留复制（semiconservative replication）  模板 原则 特点 亲代的DNA双链，每股链都可作为模板 按碱基配对原则指导新链的合成 合成的两个子代DNA分子碱基顺序与亲代分子完全一样 一条链来自于亲代的DNA链，另一条链是新合成的链 二、半不连续复制 （semidiscontinuous replication） 1、 体内仅存在5’ 3’的DNA聚合酶 2、 前导链与随从链（岗崎片段） 三、RNA引物 DNA聚合酶 不能催化两个游离的dNTP在DNA模板上聚合 需要具3’-OH的引物 RNA聚合酶 能催化两个游离的NTP在DNA模板上聚合 提供3’-OH 引物最后要被DNA聚合酶Ⅰ除去，缺口由该酶补满，再由连接酶连接 四、复制的真实性 DNA的半保留复制 遵守严格的碱基配对规律 RNA引物 DNA聚合酶在复制延长中对碱基的选择功能 复制出错是有即时的校读功能 (3’ 5’外切酶功能） DNA损伤的修复机制 第二节 参与DNA复制的一些酶类和蛋白质 DNA聚合酶Ⅰ 多功能酶 5’ 3’外切酶 3’ 5’外切酶 5’ 3’聚合酶 单链多肽 大小二个片段 切除RNA引物， 填补空缺 损伤后修复 DNA聚合酶Ⅱ与Ⅲ 多功能酶 5’ 3’聚合酶 3’ 5’外切酶 不对称二聚体 单体1-前导链/单体2-随从链 DNA 复制的主要酶 高续进性 高聚合酶活性 高产物真实性 DNA聚合酶Ⅲ全酶（DNA Polymerase Ⅲ holoenzyme） 10种不同亚基组成 θαε τ γ2 δ δ’ χψ DNA聚合酶Ⅲ※ β(4个) DNA聚合酶Ⅲ全酶 二、真核生物的DNA聚合酶 三、解链、解旋酶类 DNA解链酶（helicase） DNA结合蛋白(SSB）   解开DNA双链每个bp消耗2个ATP 与单链DNA结合,维持单链状态 (“镇纸”) 使其不受核酸酶水解 避免单链DNA自身发夹螺旋形成 使前端螺旋易解开 拓扑异构酶 四、引发体（primosome） 蛋白质 DnaA DnaB DnaC DnaG （引物酶） 结合到DNA双链复制起始部位(需ATP) 解链酶的作用 辅助DnaB结合到复制起始点 合成RNA引物 五、DNA连接酶 催化二段DNA链之间3’,5’ 磷酸二酯键的形成 缺口填补: 连接双股DNA分子中一链的缺口 双链DNA分子中双链的缺口 不能连接二分子单链DNA 第三节 DNA复制过程(起始、延长、终止） 确定复制的起始点 解开双链DNA,提供单链DNA模板 形成复制叉 DNA合成的起始和延长 形成带有新合成的DNA片段的复制泡 复制的终止 第三节 DNA复制的过程(起始、延长、终止） 确定复制的起始点 解开双链DNA,提供单链DNA模板，形成复制叉 RNA引物的形成 DNA链合成及延长 复制的终止 一、原核生物的DNA复制的基本过程  一.造成损伤的原因 自发因素 物理因素 化学因素 随机热碰撞 紫外线损伤（共轭双键） 电离辐射损伤（X线/?线） 亚硝酸盐 C U 5-溴尿嘧啶 5-BU A 氮芥类 烷化剂 羟胺 C- A 二、DNA损伤类型 三.修复机制 光修复机制 （低等生物） 不需光复活酶 需光复活酶 嘧啶单体 嘧啶二聚体 嘧啶单体 嘧啶二聚体 光复活酶（+） 蓝光 着色性干皮病（xeroderma pigmentosum） 着色性干皮病（xeroderma pigmentosum）：是一种隐性遗传性疾病，有些呈性联遗传。因核酸内切酶异常造成DNA修复障碍所致。临床以光暴露部位色素增加和角化及癌变为特征。诊断要点：幼年发病，常有同胞发病史；患儿生后皮肤和眼对日光敏感，畏光，在面部等暴露部位出现红斑，褐色斑点及斑片，伴毛细管扩张，间有色素脱失斑和萎缩或疤痕。皮肤干燥。数年内发生基底细胞癌，鳞癌及恶性黑素瘤。病情随年龄逐渐加重，多数患者于20岁前因恶性肿瘤而死亡。 应用: 1.岗崎片段之间的连接. 2.DNA损伤修复中的连接. 3.一种重要的工具酶: 限制性内切酶切割后形成的粘性末端或 平头末端的连接. 复制的起始