高中生物选修三《现代生物科技专题》经典知识点.docxVIP

-- ---- 每天背诵 10 分钟，学习生物真轻松！ 每天背诵 10 分钟，学习生物真轻松！ 高中生物 记忆材料 《现代生物科技专题》 经典知识点 班级： 姓名： 诸城繁华中学 第1页正面 共11页 第1页反面 共11页 每天背诵 10 分钟，学习生物真轻松！ ★考点 1、（Ⅰ）基因工程的诞生—— 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过 体外 DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品 。基因工程是在 DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做 DNA重组技术。 ★考点 2、（Ⅱ）基因工程的原理及技术 原理：基因重组 技术：（一）基因工程的基本工具 “分子手术刀”—— 限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链 DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使 每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 （3）结果：经限制酶切割产生的 DNA片段末端通常有两种形式： 黏性末端和平末端。 “分子缝合针”—— DNA连接酶 两种 DNA连接酶（E·coliDNA 连接酶和 T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E·coliDNA 连接酶来源于 T4 噬菌体，只能将双链 DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而 T4DNA连接酶能缝合两种末 端，但连接平末端的之间的效率较 低。 与 DNA聚合酶作用的异同 :DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。 DNA连接酶是连接两个 DNA片段 的末端，形成磷酸二酯键。 “分子运输车”—— 载体 （1）载体具备的条件：① 能在受体细胞中复制并稳定保存 。②具有一至多个限制酶切点，供外源 DNA片段插入。③具有标记基因，供重组 DNA 的鉴定和选择。  每天背诵 10 分钟，学习生物真轻松！ （2）最常用的载体是质粒, 它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状 DNA分子。 （3）其它载体： 噬菌体的衍生物、动植物病毒 ( 二) 基因工程的基本操作程序 第一步：目的基因的获取 目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因 。 原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。 直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。 具体做法是：用限制酶将供体细胞中的 DNA切成许多片段，将这些片段分别载入运载体，然后通过运载体分别转入不同的受体细胞，让供体细胞所提供的 DNA(外源 DNA)的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制 ( 在遗传学中叫做扩增 ) ，从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法把带有目的基因的 DNA片段分离出来。如许多抗虫、抗病毒的基因都可以用上述方法获得。用“鸟枪法”获取目的基因的缺点是工作量大，具有一定的盲目性。 人工合成目的基因的常用方法有 反转录法（以目的基因转录成的信使 RNA为模板，反转录成互补的单链 DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需要的基因）和 化学合成法（根据已知的蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使 RNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学的方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。如人的血红蛋白基因、胰岛素基因等就可以通过人工合成基因的方法获得） 3.PCR技术扩增目的基因 （1）原理：DNA双链复制 （2）过程：第一步：加热至 90～95℃DNA解链；第二步：冷却到 55～60℃，引物结合到互补 DNA链；第三步：加热至 70～75℃，热稳定 DNA 聚合酶从引物起始互补链的合成 。 第二步：基因表达载体的构建 ——是基因工程的核心 第2页正面 共11页 第2页反面 共11页 每天背诵 10 分钟，学习生物真轻松！ 目的：使目的基因在受体细胞中 稳定存在，并且可以遗传至下一代， 使目的基因能够表达和发挥作用。 组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因 （1）启动子：是一段有特殊结构的 DNA片段，位于基因的首端，是 RNA 聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出 mRNA，最终获得所需的蛋白质。 （2）终止子：也是一段有特殊结构的 DNA片段 ，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中 是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。第三步：将目的基因导入受体细胞 _ 转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳 定和表达的过程。 常用的转化方法： 将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 农杆菌转化法，其次还有 基因枪法和 花粉管通道法等。 将目的基因导入动物细胞：最常用